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PCR Enhancer PCR 增强剂
产品描述
PCR Enhancer是一种由多种成分组成的混合添加剂,在PCR反应中,PCR Enhancer能够有效降低高GC模板和具有复杂二级结构模板的解链温度,极大地减少DNA二级结构对PCR的影响,增加PCR反应的灵敏度和特异性,且兼容几乎所有DNA聚合酶的扩增体系。当优化PCR程序无法有效扩增目的片段时,加入PCR Enhancer往往能得到意想不到的结果。本产品可能会降低PCR的保真度。因此,在进行高保真PCR时慎用。
PCR Enhancer PCR 增强剂运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品-20 ºC保存。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:10 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
PCR Enhancer PCR 增强剂使用方法
本产品为1×浓度,推荐终浓度为1×。如50 μl反应体系中,加入PCR Enhancer 10 μl。
PCR Enhancer PCR 增强剂应用举例
以人基因组为模板,使用Taq DNA Polymerase扩增GC含量为72%的片段。
1. 反应体系配制:
ddH2O
Up to 50 μl
10×Taq Buffer(with 15 mM MgCl2)
5μl
dNTP Mix (10 mM each)
1μl
模板DNA
100 ng
引物1(10 μM)
2 μl
引物2(10 μM)
2 μl
Taq DNA Polymerase (5 U/μl)
0.4 μl
5×PCR Enhancer
10μl
2. PCR反应条件设置:
94℃
5 min
94℃
30 sec
30循环
55℃
30 sec
72℃
60 sec
72℃
7 min
4 ℃
Hold
PCR Enhancer PCR 增强剂3. 琼脂糖凝胶电泳检测:
用Taq DNA Polymerase扩增大小为690 bp, GC含量为72%的片段。只有加入5×PCR Enhancer才能扩增出如箭头所指的目的片段。
M: DNA Marker III。