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EveGreen(20×水溶液)EveGreen (20×in water)
产品描述
EveGreen是一种新一代用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料基于“按要求释放”DNA结合技术设计,结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体,在没有DNA存在时,该结构呈无荧光环状结构,一旦有DNA出现,则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。
与市场上其他荧光染料如FAM、SYBR Green I相比,EveGreen具有更**的特性:1)极高的灵敏度:在推荐浓度下使用时可以获得比SYBR Green I更强的PCR扩增信号。2)PCR抑制性极小,非常适合多重PCR及HRM分析:智能化“按要求释放”DNA结合技术使得EveGreen对PCR的抑制远小于SYBR Green I。因此,使用EveGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。同时,EveGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。较高浓度的EveGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,在推荐浓度下使用时,无扩增子之间的染料迁移现象,使EveGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析(HRM)。3)超强稳定性:在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以**的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。4)**性好:细胞膜穿透性测试表明,EveGreen几乎不能穿透细胞膜,**性高。且EveGreen没有诱变性和细胞毒性。5)优越的兼容性:和SYBR Green I光谱相似,和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EveGreen 替代SYBR Green I,无需改变任何目前使用的操作步骤和仪器设备。qPCR完成后,无需加入其它核酸染料便能直接在凝胶成像系统下观察分析。
此外,EveGreen是目前仅有的可以用于微滴式数字PCR系统的染料,在微流控PCR,恒温扩增,毛细管电泳,DNA定量以及细胞活力鉴定等领域也具有**的表现。本品以20×EveGreen水溶液形式提供。
EveGreen(20×水溶液)EveGreen (20×in water)运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。4 ºC干燥避光保存,保质期12个月。
EveGreen(20×水溶液)EveGreen (20×in water)注意事项
1)做qPCR时注意设置阳性和阴性对照。
2)为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
EveGreen(20×水溶液)EveGreen (20×in water)使用方法
1)按照下表根据所配制体系计算各组分用量*
EveGreen(20×水溶液)EveGreen (20×in water)【*】:① 请根据不同的仪器类型,不加入或加入合适浓度的参比染料ROX。
② 该体系需根据所使用的Taq酶的不同进行适当优化。
2)根据实验用量于冰上向无菌离心管中依次加入水,Taq polymerase buffer, dNTPs, MgCl2, EveGreen, Taq polymerase, and primers等配制qPCR反应体系(1×Master mix);
3)将1×Master mix 适量分装至无菌PCR管中,并加入DNA (50 ng/反应).
4)按照仪器类型选择合适的扩增程序。