- 入驻时间: 2015-11-06
- 联系人:顾磊
- 电话:021-60514606
-
联系时,请说明易展网看到的
- Email:shybio@126.com
山羊痘病毒(GTPV)核酸检测试剂盒(PCR法)实验的建立步骤
1、样品准备区 这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施: 1)PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。 2)组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理,以根据应用的需要提取DNA或RNA。 3)用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。 4)DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶**。 5)大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。 6)管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。 7)任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。
2、山羊痘病毒(GTPV)核酸检测试剂盒(PCR法)样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。
3、前PCR区 必须有专门用于准备各种反应的区域,这个区域必须保持干净,而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。
4、山羊痘病毒(GTPV)核酸检测试剂盒(PCR法)实验室试剂的操作 1)所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。 2)所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水,用0.22μm过滤的,并且是高压**。 3)在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂,在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。 4)所用试剂都应该以大体积配制,实验一下看试剂是否满意,然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。 5)所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性**的瓶子和管子。 6)新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。 7)样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。
5、山羊痘病毒(GTPV)核酸检测试剂盒(PCR法)在前PCR区建立PCR混合物 1)可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃,在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。 2)如果你的实验室使用多套引物,以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济,可以考虑分装保存够**的PCR成分。 3)作为一个规则,应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且,你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。 4)阴性样品要与每组样品同时做,以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染,阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。 5)当做阳性对照时,有两个理由决定了应该使用*少数量的核酸。 6)由于必须有对照反应,对照模板的特点应该予以考虑。
6、山羊痘病毒(GTPV)核酸检测试剂盒(PCR法)后PCR区 PCR完成以后,需要分析样品并解释数据,应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的,决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动。7、控制污染的方法 已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG,这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线,这种方法不能完全消除污染问题,但可以将污染降低几个数量级。XY100806Earle溶液100mLXY91105Hanks溶液100mLXY100927D-Hanks溶液100mLXY100215PBS缓冲液(10×)250mLXY100807杜氏PBS溶液,10×100mLXY90306胰酶消化液250mL(A)|250mL(B)XY100301秋水仙素溶液1mLXY130819Bouin固定液2LXY131223Zenker固定液2LXY131224Helly固定液2LXY131225Carnoy固定液2LXY131200细胞计数液(Vi-CELL仪专用)100次XYpyj19细胞培养基1套XYygtz22荧光探针和示踪剂1瓶XYfly100细胞分离液1瓶XYydyz23细胞凋亡诱导剂和抑制剂1瓶XY100407人**细胞分离液A型100mLXY90307青链霉素溶液100mLXY131134Percoll100mLXY131136Ficoll-Paque介质100mLXY100601细胞核微量制备试剂盒50次XY111207动物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY111208植物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY120308植物叶绿体纯化试剂盒15次XY100410超快转染试剂盒1mLXY130821阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂100次|500次XY111105MTT检测试剂盒500次XY121205CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒5mLXY81026一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)10次XY81025双染细胞凋亡检测试剂盒25次|50次XY130596荧光染色细胞凋亡检测试剂盒200次XY130862DAPI干粉10mgXY130863碘化丙啶干粉10mgXY130864Hoechst 33258干粉10mgXY130865Hoechst 33342干粉10mgXY130595双荧光素酶活性检测试剂盒100次XY130597萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒100次XY130598海肾荧光素酶活性检测试剂盒100次XY131012萤火虫荧光素1mLXY131019无内**萤火虫荧光素25mgXY130599β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒300次XY130802ADP/ATP发光法细胞活力检测试剂盒200次XY130801ATP发光法细胞活力检测试剂盒200次XY121104增强型天狼猩红染色试剂盒100mLXY121105茜素红S染色试剂盒100mLXY130822苏木素染色液15ml
细胞试剂盒
XY008-2细胞增殖与毒性检测试剂盒(标准型) Cell Counting Kit-8100次QHE002-100ECL 高灵敏ECL化学发光检测试剂盒(高灵敏型)50ml/50mlQHP001-3Protein A+G Sepharose Beads2ml(50%slurry)XY002-2Annexin V-EGFP/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒20 assaysXY003-2Annexin V-RFP细胞凋亡检测试剂盒20 assaysXY005-2Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒20 assaysQHT003-2TransAid 2000 Transfection Reagent 转染试剂0.75mlXY001-50细胞周期与凋亡检测试剂盒 Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit50 assaysQHK003-200高保真KOD试剂盒200UQHM030-50甲基化试剂盒50TXYT005-1Tunel细胞凋亡检测试剂盒(FITC)10TXYP005-1Tunel细胞凋亡检测试剂盒(POD)10T
PCR检测试剂盒