产品名称：人角膜上皮细胞

收到人角膜上皮细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

人角膜上皮细胞人角膜是**的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能。角膜包含三个不同的细胞层，外层是上皮细胞，内层是内皮细胞，中间层基质层（角膜细胞）。角膜上皮细胞能参与先天性**，它能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统。还能高效表达醛脱氢酶，防止UV-和4-羟基壬烯醛对细胞造成伤害。角膜内皮细胞增殖是由细胞因子控制的，比如说表皮生长因子，它能激活上皮细胞深层的同源受体。体外培养角膜内皮细胞已经可以替代检测动物眼睛的产物而用于毒理学检测和人角膜上皮细胞分化的分子机制的研究。  

    人角膜上皮细胞(HCEpiC)提取于人角膜组织，于原代冻存。每管含有细胞数>5×105 cells/ml，此细胞通过Cytokeratine-18 和-19**荧光染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**。细胞可以达到10倍增。

推荐培养基（CEpiCM, Cat. No. 6511）

Reference

[1] Zhang, J., Wu, X. Y. and Yu, F. S. (2005) Inflammatory response of corneal epithelial cells to pseudomonas aeruginosa infection. Curr. Eye Res. 30:527-534.

[2] Pappa, A., Brown, D., Koutalos, Y., Degregori, J., White, C. and Vasiliou, V. (2005) Human aldehyde dehydrogenase 3A1 inhibits proliferation and promotes survival of human corneal epithelial cells. J. Biol. Chem. 280:27998-28006.

[3]. Yang, H., Mergler, S., Sun, X., Wang, Z, Lu, L., Bonanno, J. A., Pleyer, U. and Reinach, P. S. (2005). TRPC4 knockdown suppresses EGF-induced store operated channel activation and growth in human corneal epithelial cells. J Biol Chem.

人角膜上皮细胞传代方法：
 收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，人角膜上皮细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次。 
。
注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法：   冻存液：基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
储存：液氮储存
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