- 入驻时间: 2015-11-06
- 联系人:顾磊
- 电话:021-60514606
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联系时,请说明易展网看到的
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提供的人结肠粘膜上皮细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。研发的人结肠粘膜上皮细胞完全培养基(CM-H040)能提供细胞*佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、**及其他类型的**。
购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和l技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
人结肠粘膜上皮细胞
Cat NO.: CP- H040
一、产品简介
1、产品名称:人结肠粘膜上皮细胞
2、组织来源:人结肠组织
3、产品规格:5×105cells / 25cm2培养瓶
4、细胞简介:
人结肠粘膜上皮细胞,分离自正常人结肠组织,探讨正常人肠粘膜上皮细胞的分离、体外培养方法,为研究人肠粘膜上皮细胞以及与肠粘膜相关**建立合适的细胞模型。
本公司生产的人结肠粘膜上皮细胞采用混合酶解法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶,细胞纯度可达85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**等。
5、培养基信息:
1)培养基类型:DMEM
2)添加因子:FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin 等
二、细胞培养状态
发货时发送电子版照片
三、使用方法
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2 培养瓶,75%酒精**,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂与操作环境的不同,以上方法供各实验室参考。
人结肠粘膜上皮细胞细胞基本技术
冻存细胞的复苏
人结肠粘膜上皮细胞应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
传代:
贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
冻存
将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。
人结肠粘膜上皮细胞
支原体污染及检测:
(1).支原体污染在细胞培养中*常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于**和病毒之间的目前所知能独立生活的*小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,*小直径0.2um,可通过滤器。
1膀胱癌细胞
支原体在污染细胞后,它通过影响细胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长,并能降低细胞的融合率。因此,在运用各种细胞系进行实验研究时,首先要证明所用细胞有无支原体的污染。
经过严格质控,不含有**、**、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。
(2).支原体污染后,培养基可不发生浑浊,细胞病变轻微或不明显,因此难以发现。目前,支原体检测的方法有以下几种。
(a).相差显微镜观察;
(b).低张处理地衣红染色法;
(c).荧光染色法;
(d).酶标法;
(e).PCR法:基础医学细胞中心使用该方法进行检测。
优点:灵敏度高,检测耗时短,样品量小
(只需50ul细胞培养用液上清)。
缺点:引物及制剂费用较高。
★★★★★希望这些基本技术及资料可以帮到您★★★★★
人结肠粘膜上皮细胞
特点:
1.传代情况:P2
2.活性好、稳定性高、适应性强,易培养
3.传代快、多:2-3天传一代,普通可传10代以上 肿瘤细胞无限制
4.纯度高达95% 无污染和其他杂细胞
5.有技术疑问可以提供一对一的解答:专业,及时,耐心
6.货期短,一般冻存管5-7个工作日,复苏7-15个工作日。
★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.
种属来源:小鼠、大鼠、人、猴、牛
组织来源: 各组织癌细胞、表皮细胞、上皮细胞、等等....
细胞都是经过严格质量控制。
Colo205 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Colo320DM 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
D341 Med 人髓母细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Daudi 人B**细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
DU145 人前列腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
G-401 人肾癌Wilms 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
GLC-82 人肺腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCT116 人结直肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HCT-8 人结肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HEC-1B 人**内膜癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hela 人宫颈癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hep G2 人肝癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Hep-2 人喉癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HL-60 人白血病细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HOS 人骨肉瘤细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HT-1080 人纤维肉瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HT-29 人结肠腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
HuTu-80 人十二脂肠腺癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3 人绒癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16 人绒癌细胞VP16耐药株 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Jurkat E6-1 人T细胞**瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
Jurkat77 人T**瘤细胞亚系 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
K562 人红白血病细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
KB 人口腔上皮癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
LNCaP 人前列腺癌(B类) 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
LoVo 人结肠癌 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
M17 人神经母细胞瘤 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
M2 待查 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
MCF7 人乳腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
MCF7B 人乳腺癌细胞 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周