通常MTT试剂浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的**，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器好用铝箔纸包住。
需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞数。在用酶标仪检测结果的时候，为了实验结果的线性，MTT 吸光度好在0-0.7 范围内。
MTT试剂一般好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就不能再用了。
MTT试剂有致癌性，用的时候小心，有条件好带那种透明的簿膜手套。配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感；往96孔板加时不避光也没有关系，毕竟时间较短，或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉。配制MTT时用用PBS溶解，也有人用生理盐水配，60℃水浴助溶。
PBS配制方法：Nacl 8g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、KH2PO4 0.24g，调pH 7.4，定容1L。