常规(HE)染色|实验技术服务

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常规(HE)染色|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
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测序实验流程：
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
试剂与仪器:
A:0.5~1% 的伊红酒精溶液:
称取伊红Y 0.5~1 g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精(即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可)100毫升溶解。
B:苏木素染液配方:(配制3000 ml，可按比列减少)
苏木精6 g
无水乙醇100 ml
硫酸铝钾150 g
蒸馏水2000 ml
碘酸钠1.2 g
冰醋酸 120 ml
甘油 900 ml
配制方法:将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，*后加入冰醋酸和碘酸钠。
C:1%盐酸酒精分化液:将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。
常规he染色步骤:
(1)二甲苯(Ⅰ) 15min
(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min
(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min
(4)100%乙醇(Ⅰ) 5min
(5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min
(6)80%乙醇 5min
(7)蒸馏水 5 min
(8)苏木精液染色 5 min
(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s
(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s
(11) 稍水洗 10-30 s
(12)蒸馏水过洗 1-2 s
(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(16) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s
(17) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s
(18) 无水乙醇 5-10 min
(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(20) 二甲苯(Ⅰ) 2 min
(21) 二甲苯(Ⅱ) 2 min
(22) 二甲苯(Ⅲ) 2 min
(23) 中性树胶封固
注:①第(11)、(12)步可省去，(13)步冲水时间需延长至20-30min。
②第(21)步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。