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公司简介：enogene      http://www.hbzhan.com/st166246/
一、原理
本CCK-8 细胞活力检测试剂盒含有CCK-8，在电子载体存在的情况下CCK-8 被细胞内脱氢酶氧化还原后生成水溶性的橙黄色甲臜染料能够溶解在组织培养基中，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。该无菌CCK-8 溶液可以直接加入到细胞培养液中；不需要预配其它成分。CCK-8 法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT 法。
二、试剂盒组成
目录号组份规格储存条件
E1CK- 000208-1 CCK-8 溶液1mL（100 assays） 4℃避光，一年有效
E1CK- 000208-5 CCK-8 溶液5mL（500 assays） 4℃避光，一年有效
E1CK- 000208-10 CCK-8 溶液10mL（1000 assays） 4℃避光，一年有效
三、自备物品
低速离心机、酶标仪（450nm 波长）、平板摇床、微量移液器、96 孔培养板、CO2 培养箱
四、操作步骤
1. 在96 孔板中加入100 ul（约1×104）的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24 小时(在37℃，5% CO2的条件下)。
2. 向培养板中加入100 ul完全培养基或含有不同浓度受试样品的完全培养基。
3. 将培养板在培养箱继续培养一段适当的时间(例如: 48小时或72小时)。
4. 每孔加入10 ul CCK-8溶液(尽量不要在孔中生成气泡)。
5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
7. 如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 μl 0.1 M HCl溶液或者1%（W/V）SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
五、结果判断
(1) 细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加CCK-8，无细胞），各重复孔的OD 值取均数±SD。
细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。
细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
(2) 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)或T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。