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【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep公司简介
IMMUNOSTEP是一家拥有混合业务模式的公司,一方面开发,制造和销售用于根据合同执行的研究和诊断以及其他开发服务的产品。
关于产品,该公司专注于流式细胞术中使用的试剂,试剂盒和设备的开发和商业化。这些产品用于研究和诊断。
公司在研发领域拥有非常接近市场的“管道”,解决了诊断领域的医疗需求,并获得10项国际**的支持。
为加强我们对提供高质量产品的承诺,IMMUNOSTEP正在通过ISO 9001:2008和ISO 13845:2012认证的质量管理体系,该体系符合医疗器械和试剂制造的国际标准。
IMMUNOSTEP成立于2001年,位于萨拉曼卡(西班牙),萨拉曼卡大学科学园,西班牙历史*悠久的大学,也是连续运营的第三古老的欧洲大学,在流量诊断服务和临床研究Cytometry全球认可。
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
流式抗体(荧光抗体)细胞染色步骤
染色缓冲液 (BSA)的配制: PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱备用。
准备单细胞悬液:淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。
用 冰染色缓冲液 洗细胞2次,离心细胞,用冰染色缓冲液重悬细胞,使终浓度为2×10 7 细胞/ml。
各取50ul(10 6 细胞)细胞悬液到2个圆底的Ep管中。
根据抗体说明书在其中1个Ep管中加入合适的抗体量,另外1个加入同型对照抗体,冰上避光孵育20分钟(建议每5分钟轻轻混匀,以免细胞沉积)。根据荧光抗体的亲和力适当延长染色时间。
用1ml染色缓冲液洗2次去除未结合的抗体,300×g离心5分钟,每次离心后小心吸取上清。
用适量染色缓冲液(如500ul)重悬细胞。
流式细胞仪分析染色结果(不超过4小时)。如果暂时无法检测,也可以将染色后的细胞用4%多聚甲醛固定后,避光储存在4度。固定后的细胞可以保存*多一个星期。
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
流式抗体CD45R中的R表示什么意思
通常抗体说明书上写的是:每百万个细胞加_____微升抗体,就是一个test, 仔细看说明书,写得很详细(至少BD ebioscience IMMUNOSTEP说明书都很详细,别的不清楚)你的25test就是按照这个标准算可以做25个样
【流式抗体CD4/CD8】FCM,流式抗体,超过科研的质检 西班牙Immunostep
流式操作步骤:表面抗体染色
全血样本:
1、取一定体积的抗凝全血,(人100ul,小鼠取30~50ul)
2、加入适量的表面抗体,室温孵育15min (抗体用量和孵育条件详见抗体说明书)
3、按使用的溶血素说明裂解红细胞后,加入1~2ml 流式染色缓冲液洗一次
4、300g离心5min 弃上清,用500ul流式染色缓冲液重悬
5、立即上机,如不能立即检测,用0.5ml 0.1~4%多聚甲醛重悬,避光4℃保存24小时内上机分析
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