气相色谱法测定午餐肉中的有机氯农药

一、目的与要求：

1、掌握有机氯农药残留量的测定方法

2、初步掌握气相色谱仪的使用方法。

二、原理：

    气相色谱法是一种比较新型的物理分离的分析方法，其作用原理是当样品组分经气化呈气态的载气的携带下，通过填满固定相的色谱柱时，由于样品组分在气-液(或气-固)两相中的分配(或吸附)系数的不同而得到分离。在柱后接上检测器，显示色谱峰，与有机氯农药标准溶液比较即可定性和定量地测得样品的组成成分。

    三、试剂与仪器：

    1、试剂

    (1)丙酮重蒸

    (2)石油醚60-90℃经全玻璃系统蒸馏器重蒸至色谱图无异常．

    (3)无水硫酸钠(AB)，550℃灼烧4小时。

    (4)内标溶液，以环氧七氯为内标：称环氧七氯0.0100克以上，用少许丙酮溶解，用石油醚定容至100毫升。

    (5)农药的标准溶液：

    λ分另Jj称取2-666，β-666，γ-666，δ-666，PP`-DDE，0P<sup>，</sup>-DDT，PP`-DDD，PP-DDT标准样品

各0.01克用少量丙酮溶解后，以石油醚定容100毫升，(100ug／ml)称A液。

    B、精密吸取2-666，γ-666，A溶液5毫升，δ-666A溶液10毫升，

β-666，PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PP-DDTA溶液各25毫升，置于1000毫升容量瓶中，用石油醚定容为B液，δ-666，γ-666，B液浓度为(0.5ug／ml)，6-666B液浓度为(1ug／ml)，β-666，PP`-DDE，0P`-DDT，PP-DDD`，PP-DDT`浓度为(2.5ug／ml)，

    c、配制几种不同浓度应用的标准C液。

    分别取8种B液各16毫升，14毫升，12毫升，10毫升，8毫升置5个100毫升容量瓶内，分别加100微升环氧七氯后用石油醚定容到100毫升为C液。

    2、仪器

    气相比色谱仪，电子捕获检定器。

    色谱柱长1.2米，内径3毫米螺旋形不锈钢柱固定液用OV-173％及QF15％混合液。

    柱体Chromosorbw  80-100目

    柱温190℃，载气高纯N₂

    检测温度210℃，载气流40ml／分

汽化温度210℃。

    四、高脂样品的提取：

    (1)消化：

称取均样10克于200毫升园底瓶中，加入35毫升高氯酸冰醋酸(1：1)混酸于90℃水浴上加热(加热时要不停地振摇以免结成炭粒)，直到样品完全溶解为止，溶液呈紫红色液体，冷却，加水35毫升(水：酸＝1：1)，如溶液发热仍需冷却。

    (2)抽提：

    用(bp60-90℃)石油醚，以40，30，30毫升萃取3次，合并萃取液，通过无水硫酸钠柱子，抽提液全量为100。

    (3)净化：

    将l00毫升石油醚抽提倒入250毫升分液漏半中，加10毫升浓硫酸(酸：石油醚＝1：l0)，轻轻振摇，静置分层(放置过夜)，然后放掉下层酸液，重复1-2次，加2％硫酸钠40，30，30毫升洗至中性，加入无水硫酸钠5克，定容至l00毫升，并加入内标环氧七氯lOml，进入气相色谱仪进行测定。

    (4)测定

    a、将配制的各种浓度标准c液进入色谱仪得到各种浓度的标准色谱图山峰顺序为α-666，β-666，γ-666，δ-666，环氧七氯PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PPl-DDT，并量其峰高值。

    b、取净化液适量(一般在0.2UL-lOul之间，使其响应值在检测器线性范围内)注入气相置谱仪内，并选取与样品峰高相近的标准农药峰高代入下式。

    计算：

    农药残留含量PPm。

    按下式用内标校正。

    残留量：

PPM＝(H／H²) × (C／W) X (H_O／H_O`) X (W<sub>O</sub>／C<sub>O</sub>`)

H／H`：样品中该组分的峰高和标准液中该组分峰高。

H_O／H_O：标样中内标的峰高和试样中内标的峰高。    ·

C／W：注入到色谱仪中的标准液所含该组分的浓度(ug／m1)和样品的重量。

    W_O／C_O^,：样品W中所加人的内标重量(ug)和标准液中所含的内标浓度（ug/ml）。