虽说目前定量PCR仪的使用已颇为广泛,但其售价仍然不菲,大部分仪器的价格在3万-5万美元之间,这样,很多实验室只有1-2台仪器,供多个研究人员共同使用。我们要预约加排队,好久才能轮上一次。为了让定量PCR技术更为普及,美国Helixis公司推出了一款全新的PIXO定量PCR仪。
首先来说说Helixis公司,也许你并没有听说过,但是它的来头可不小。它的创立者是美国加州理工学院有名生物学家,诺贝尔奖获得者DavidBaltimore博士(37岁时因证实RNA逆转录酶的存在而获奖)和世界有名光子与微细加工专家AxelScherer博士。另外,公司里还有不少牛人。Illumina公司CEO Jay Flatley也是它的董事会成员。
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如此强大的组合,决定了PIXO定量PCR仪的非同一般。它在市场定位,温控系统,光学系统及软件界面,以及服务模式等方面,都做了颠覆式的**,全然不同于市场的同类产品。
这款仪器的定位是个人化的定量PCR,简单易用,**快速,可以满足定量,等位基因突变的熔融曲线分析,实时HRM(高分辨熔融曲线分析)等多种应用。更重要的是,它的价格也很平民化,让每位研究人员都能从定量PCR技术中得到高质量的实验数据。
PIXO的温控系统也是极大的**。大部分的定量PCR仪,由于采用孔板式模块,由于本身热容量和加热区域均较大,所以需要采用多块Peliter加热,Peliter之间本身就有温度差异,孔间的温度均一性一般在0.5°C左右,边缘效应也难以消除,变温后的平衡时间,大约需要15秒。后来有些定量PCR仪就采用空气加热。用空气做介质的优点是与反应体系无缝接触,但是空气的导热性差、比热小的弱点也很明显,因此样本量也较小。
在否定了固体、气体之后,下一个是什么?没错,就是液体。PIXO温控系统,包含了一个精密电铸的空心银槽,其中密封了流动的传热介质,通过单个Peliter加热或制冷,电磁马达驱动的两个相对的叶轮,进行快速的混匀,导热介质在槽间流动,保证传热速率和均一性,而且没有边缘效应,孔间温差小于0.1°C,测试多台机器在65°C时的均一性在0.06°C,95°C时为0.1°C,特定的温控系统,保证了实验的CV值小于0.25%。
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如此具有**性的仪器,读者当然也不会错过。PIXO定量PCR仪被广大读者评选为2009生命科学十大**产品。生物通特地连线了Helixis的中国代理商——香港基因公司市场部的产品经理黄国庆先生,询问了一些读者关心的问题。
您能不能介绍一下PIXO定量PCR仪的研发背景。
黄先生:目前,大多数定量PCR仪,价位偏高,仍然在3万-5万美金之间,导致超过70%的科学家和10-12位同事共享一台定量PCR仪;而且,每次实验时间比较长,需要接近两个小时,这些因素极大地制约了科学家更好的利用定量PCR技术。因此,为了满足全球科学家的要求,美国Helixis公司推出了快速、高性能的PIXO定量PCR仪,旨在进一步加快定量PCR技术的普及。Helixis公司是由美国加州理工学院有名生物学家,诺贝尔奖获得者DavidBaltimore博士和电机工程专家AxelScherer博士共同创立的。PIXO定量PCR系统四通道同时检测,具有定量PCR系统的所有功能,包括**定量、相对定量,基因分析和高分辨率熔解曲线功能(HRM)。值得一提的是,PIXO定量PCR系统的价格平民化,使得每位科学家都能利用定量PCR技术得到高质量、重复性好的实验数据。
PIXO定量PCR仪的温控系统有何特别之处?
黄先生:PIXO定量PCR仪的温控系统是一个精密电铸的空心银槽(图1), 中空银槽是密闭的,内含一种特殊液体导热介质和两个反方向由电磁马达驱动的搅拌装置。在PCR循环过程中, 液体导热介质在中空银槽中快速流动,使热量从半导体均匀传递到整个银槽。这种****的设计大大消除了孔间的温度差异和孔板的边缘效应,控温更准确,温度均一性好(图2),从而保障实验结果高度真实、可靠。
图1. PIXO? Thermal System
图2. Thermaluniformity, multiple PIXO? instruments
PIXO? | TNU @ 60°C | TNU @ 95°C |
1 | 0.06 | 0.1 |
2 | 0.05 | 0.1 |
3 | 0.08 | 0.1 |
4 | 0.05 | 0.1 |
Average | 0.06 | 0.1 |
PIXO定量PCR仪定位为个人化的定量PCR,那么它在设计上与其它定量PCR仪有何不同?
黄先生:“Small ButPowerful”是PIXO定量PCR仪的真实写照。至于与其他定量PCR仪在设计上的不同,主要体现在热力学系统上。大部分的定量PCR仪,采用固体金属导热模块,由于本身热容量和加热区域均较大,所以需要采用多块Peliter加热,而Peliter本身也存在温度差异,结果导致孔间的温度均一性一般在0.5°C左右,边缘效应也难以消除;而且,在PCR循环过程中,要达到每个步骤设定的温度,大约需要15秒平衡时间。PIXO定量PCR仪体积小,采用了**的中空银槽,密闭一种特殊液体导热介质,同时通过单个Peliter加热或制冷,保证了控温的**性和准确性。
目前是否有国内的客户使用了PIXO定量PCR仪?他们的评价如何?
黄先生:PIXO定量PCR仪在墨西哥、泰国都已经用于甲型HINI病毒的分子检测。墨西哥城公立大学国家理工学院人类流感诊断实验室,负责墨西哥城绝大部分的HINI病例检测,该实验室的OctavioGarcía教授表示,他喜欢PIXO仪器的小巧,只有25磅,比其它仪器都轻。这样,他就能携带它去南部恰帕斯山的农村诊所,诊断当地的稀有病毒,或确定非洲的HIV患者是否需要改变**。现在,由于当地没有诊断检测设备,信息过来时已经太晚了。
PIXO定量PCR仪09年10月份才开始在国内销售。目前,国内已经有11个客户订购了该系统,包括厦门大学、同济大学、西南大学、内蒙古大学等。