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实验外包-HE染色石蜡切片制作的基本过程
实验外包-HE染色石蜡切片制作的基本过程
1、HE染色取材与固定
从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或**的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
2、HE染色脱水透明
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
3、HE染色浸蜡包埋
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
4、HE染色切片与贴片
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
5、HE染色脱蜡染色
常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，*后入蒸馏水，就可染色。
HE染色过程是：
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。
　　②酸水及氨水中分色，各数秒钟。
　　③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
　　④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
　　⑤入酒精伊红染色液染色2～3分钟。
6、脱水透明
染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
7、封固
将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。
上海拜沃生物科技有限公司专业实验外包-HE染色服务，详情请咨询。
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电话： 55890177
联系人：李波
在线QQ：516260426
 
 
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