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细胞划痕实验(Wound Healing)|实验技术服务

关键词:细胞划痕实验(Wound Healing)|实验技术服务
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细胞划痕实验(Wound Healing)|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
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测序实验流程：
细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”**。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
特点：
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。
4. 研究细胞迁移的体外实验中*简单的方法。
实验步骤：
1. 培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记（方便拍照时定位同一个视野）。
2. 细胞消化后接入12孔板，数量以贴壁后铺满板底为宜（数量少时可培养一段时间至铺满板底）。
3. 细胞铺满板底后，用1 ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致。（人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法*大的缺陷。）
4. 吸去细胞培养液，用PBS冲洗孔板三次，洗去划痕产生的细胞碎片。
5. 加入无血清培养基，拍照记录。
6. 将培养板放入培养箱培养，每隔4-6小时取出拍照。
7. 根据收集图片数据分析实验结果。

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