大鼠髓核细胞的原代培养总结会

2024年4月18日，周四，公司组织，由实验室主管刘博主导，实验室全体成员参与，对大鼠髓核细胞的原代培养的相关知识点，进行了培训与交流。本次会议，主要针对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型，刘博就实验方法深入进行了讲解，实验室人员展开激烈的讨论。以下为讨论内容的总结：

1.脱臼法处死SD大鼠，剃毛，75%酒精浸泡5min。

2.从尾椎处剪开皮肤，取出腰椎。用含2%双抗的PBS冲洗3-5次。

3.分离椎节，切开纤维环分离凝胶状髓核，将凝胶状髓核置于PBS中冲洗3次，去除血迹，剪碎髓核组织呈1mm3大小，移至离心管后加入5倍体积的1.5%Ⅱ型胶原酶，37℃摇床消化2h。

4.消化结束，20%FBS终止消化，100um滤网过滤，1000r/min离心5min，弃上清后DMEM/F12重悬，按1×105/ml接种于培养板，加入含1%双抗和 15% FBS 的 DMEM/F12，置于37 ℃细胞培养箱中培养。

5.4d后换液，以后每3天换液 1 次，细胞达 90% 融合后传代。

本次会议，提升公司对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型的重要知识点的认知，针对相关实验，更好的把控实验质量，提高了公司在这方面的经验积累。