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Western Blot注意事项  

Western Blot注意事项  

1.滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。

2.滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。

3.因为DEPF膜的疏水性,膜在甲醇中浸湿。而且在以后的操作中,膜也随时保持湿润(干膜法除外)。

4.滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤纸换新的。

5.转移时间一般为1.5 小时,( 1mA-2mA/cm2,10% gel),可根据分子量大小调整转移时间和电流大小。

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