实验动物常用的处死方法

安乐死是英文单词Euthanasia的中译，Euthanasia一词来源于古希腊语，意思是美好的死亡、快乐的死亡、无痛苦的死亡。日本学者将Euthanasia翻译为“安乐死”，这一译称为中国学者所接受。实施安乐死一般遵循以下原则：①尽量减少动物的痛苦，尽量避免动物产生惊恐、挣扎、喊叫。②注意实验人员**，特别是在使用挥发性麻醉剂（乙醚、安氟醚、三氟乙烷）时，要远离火源。③方法容易操作。④不能影响动物的实验结果。⑤尽可能缩短致死时间，即安乐死从开始到动物意识消失的时间。⑥判定动物是否被安乐死，不仅要看动物呼吸是否停止，而且要看神经反射、肌肉松弛等状况。

1物理方法致死

1.1急性失血法

此法应用于大鼠和小鼠等小动物时，常是剪断动物的股动脉，放血致死。可以采用摘眼球法，在鼠右侧或左侧眼球根部将眼球摘去，使其大量失血致死。如果是犬、猫或兔等稍大型动物应先使动物麻醉、暴露股三角区或腹腔，再切断股动脉或腹主动脉，迅速放血。动物在3～5 min内即可死亡。采用急性失血法动物十分安静，对动物的脏器无损害，但器官贫血比较明显，若采集组织标本制作病理切片时可用此法。

1.2断头法

此法适用于鼠类等小动物，可用直剪刀，也可用断头器。断头法处死动物时间短，并且脏器含血量少，若需采集新鲜脏器标本可采用此法。断头**引起血液循环的突然中断和血压的迅速下降并伴随意识的消失，只能用于恒温动物。对于变温脊椎动物不推荐用断头法，因为它们相对能更高的抵制缺氧。

1.3空气栓塞法

当空气注入静脉后，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉可造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快死亡。此法适用于较大动物的处死，家兔、猫用此法需注入20～40 mL空气，犬致死的空气剂量为80～150 mL。由于应用此法后，动物死于急性循环衰竭，所以各脏器淤血十分明显。

1.4断髓法

此法适用于小鼠、大鼠等小动物。用于家兔时可敲击延髓致死，用木锤用力锤动物的后脑部，破坏延脑，动物痉挛后死亡，简单迅速。用于蟾蜍、蛙类可直接捣毁脊髓，将金属探针插入枕骨大孔，破坏脑脊髓使动物死亡，操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内。

2化学药物致死

常用安乐死药物有：吸入式麻醉剂（包括CO2、CO、乙醚、三氯甲烷等）、氯化钾、***类麻醉剂、二氯二苯三氯乙（DDT）等。

2.1药物吸入

药物吸入致动物死亡适用于啮齿类，如小鼠、大鼠、豚鼠等小动物，操作简单，是实验中安乐死的常用方法。因CO2无毒，制备方便，效果，是常用的致死药物。对1日龄的雏鸡研究表明，CO2是有效的安乐死试剂，它不引起痛苦，抑制神经紧张活动，在5 min之内引起动物的死亡。CO2浓度越高，动物失去意识的时间就越短。当CO2浓度增长缓慢时，也会延长动物失去意识的时间。可以采用特制的安乐死箱，能使CO2气体充满整个箱室，麻醉致死效果和人员**。

2.2药物注射

药物注射是通过将药物注射到动物体内，使动物致死。这种方法适用于较大的动物，如兔、猫、犬等。

氯化钾适用于家兔和犬，可采用静脉注射的方式。高浓度的钾可使心肌失去收缩能力，心脏急性扩张，致心脏迟缓性停跳而死亡。实验证明注射氯化钾后细胞损伤严重，线粒体肿胀很明显，嵴模糊不清，细胞核明显异常。家兔和犬的致死量分别为10%氯化钾5～10、20～30 mL。

***类麻醉剂适用于兔、豚鼠，用药量为深麻醉剂量的25倍左右。一般用量为90 mg/kg，约15 min内死亡。该类药物能抑制丙酸氧化酶系统，从而抑制中枢神经系统（特别对大脑皮质及下丘脑），使反射机能逐渐消失。也有人称用麻醉方法处死实验动物不应称为安乐死，这是按照设定程序“将其适时处死”，选用了无痛方法，在应用上还存在争议。

DDT适用于豚鼠、兔、犬。豚鼠致死量为3.0～4.4 mg/kg，家兔为0.5～1.0 mg/kg，犬为0.3～0.42 mg/kg。豚鼠皮下注射，家兔和犬静脉注射。其机理可能与DDT 损伤细胞修复和免疫抑制有关，并能诱导肝微粒体酶系统，使某些酶发生抑制，而且本身经肝代谢而表现肝毒性作用。

3特殊实验动物的处死

处死昆虫一般用烫死法，快速，可避免昆虫挣扎或人的抓捏而造成虫体的损伤。很多直翅目昆虫的腿可能会因剧烈的抽搐而脱落，可在制作昆虫标本时用万能胶粘上去，不会影响虫体的完整和美观。处死青蛙时可用酒精麻醉，用镊子夹取一浸透95%酒精的棉球，塞入青蛙口腔中，三四分钟后，青蛙便瘫倒不动，效果**。也可用香烟麻醉，向装有青蛙的瓶里吹几口烟，盖紧瓶盖，几分钟后，青蛙瘫倒不动。狐的处死方法为将人用氯化琥珀酞胆碱针剂1支（2 L，内含100 mg）稀释100倍，注入其心脏中，狐在10～60 s内昏迷，4～7 min内死亡，昏迷后即可取皮。

随着时代的进步与发展，科学工作者在从事生命科学研究时，对待实验动物，越来越考虑到动物福利的问题。动物福利是社会进步和经济发展到阶段的必然产物，体现了人与动物协调发展的趋势。应爱护和善待实验动物，树立人性化的实验精神。这样不仅能实验动物的质量，实验结果的可靠性和准确性，还能培养良好的临床心理，实现人性化的实验与教学。