结合实验中的实际情况，引起 ELISA实验 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点，试剂因素、标本因素和操作因素。
一、试剂因素
1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。
2. 不同厂家的试剂不能混用，包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异，还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如：有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%，标记酶的活性及显色液的稳定性比较差，使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。
3. 要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为 1 年，建议尽量选择刚出厂的试剂盒。
4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围，用一种指标来冒充其它指标，造成各种种属、各种指标都可以做的假象。
比如用 TGF beta 这样的指标代替大多数试剂盒的其它指标作为检测抗体，同样可以获得良好的标准曲线。因为 TGF beta 在大多数哺乳动物中（human, mouse, rat, pig, bovine, etc.）都有广泛表达，种属间的氨基酸序列同源性达 ，TGF beta 随着其他因子的影响，其表达水平也会发生相应的变化，使得实验者难以查觉。
在分析完可能出现的因素后，分享以下鉴别方法，大家可以直接去丁香园搜索「如何鉴别真假 ELISA 试剂盒」。
（1）利用干扰实验可辨别 ELISA 试剂盒是否检测目的抗原。
（2）如果购买了同一公司的 ELISA 试剂盒 A 和 B，利用交叉实验可辨别 ELISA 试剂盒真伪。
（3）指标本身也可以鉴定试剂盒的真伪。
二、ELISA实验标本因素和操作因素
血清是常用的 ELISA 标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种：
1. 内源性物质
有人认为大约 40% 的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。
2. 外源性物质
外源性物质常常是由于用于 ELISA实验 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被**污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。
三、总结
当 ELISA 测定结果与预期或文献报导中不一致时，应该考虑试剂因素，这个是做好实验获得正确数据的前提，其次还有标本因素和操作因素等多方面进行分析，并应采取相应措施排除干扰作用，从而为实验提供正确可靠的检测结果。
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