实验动物的选择
易感牙周炎的动物种属很多,一般可选大鼠、金黄地鼠、狗、猪、猴等。其中猴、狗的牙周解剖、组织病理、微生物及免疫学等都有与人相似,常作为牙周炎病因、病理研究的动物模型。但这类动物价格昂贵,饲养和实验过程要求高,难以用来开展大规模的研究。大鼠是啮齿动物,其磨牙区牙龈龈沟、牙槽嵴形态及牙周组织学表现与人较为相似,且价格便宜、操作简单。所以,作为一种模型动物,大鼠越来越多地被用于牙周炎的实验研究。
牙周病动物模型的建立
单纯局部结扎法:结扎线法是较为成熟且被广泛应用的建立牙周炎动物模型的方法。此法操作简单,而且能在短期内造成牙周炎。结扎线作为一种菌斑形成的促进因素,容易造成菌斑的持续积聚、炎症细胞的持续浸润,从而造成牙周结缔组织破坏和牙周骨丧失[1,2] 。常用的结扎材料有细丝线、尼龙线、棉线、正畸用钢丝及弹性橡皮圈等。在牙周病的研究中,大鼠一直是被广泛使用的啮齿动物,丝线结扎法造成大鼠牙周炎也是公认的牙周炎动物模型之一。
接种致病菌法:采用单纯在口腔及牙龈缘部位接种牙周炎可疑致病菌的方法,也可建立牙周炎动物模型。Schreiner等[3]用野生型伴放线杆菌(Aa)接种于大鼠食物中,建立了牙周炎模型。通过单纯把野生型伴放线杆菌接种于食物中,从而定植在口腔的过程,更接近自然的感染过程;而通过直接注射或局部涂抹**建立的模型,缺乏疾病的初级阶段,忽略了基因在疾病发生中的重要作用。内**是革兰阴性菌细胞壁外膜中的脂多糖(LPS)成分,对牙周组织有很高的毒性,被认为是牙周炎症的重要病因之一。用脂多糖或内**诱导的牙周炎模型简便,可比性强,具有可重复性。
饲以高糖黏性食料:通过制定牙周炎食谱,以达到菌斑堆积的目的。这种软食易黏附于牙面,不利于牙齿自洁,从而促使菌斑的附着、堆积和滋生。给予6周龄雄性金黄地鼠以高糖食谱,也称致牙周病食谱(Keyesdiet 2000),100g食物中包括蔗糖56g、全脂奶粉28g、全麦粉6g、酵母粉4g、肝粉1g、食盐2g、新鲜蔬菜4g, 12周后诱导出牙周炎。
多种方法联合应用:丝线结扎法用于动物是较为成熟的建立牙周炎模型的方法,而接种牙周可疑致病菌和高糖饲料喂养也是较为常用的方法。单独使用某种方法,存在着建立牙周炎模型可控性差的特点;而多个诱导因素的联用,可较快较好地诱导牙周炎的形成。国内吴亚菲等[4]研究结果提示:牙颈部丝线结扎+接种牙周可疑致病菌+高糖水,在2周时就能成功诱导牙周炎的形成。
全身因素联合局部因素:***障碍、免疫状态等全身因素,是牙周炎发**展的促进因素,全身因素通常与局部因素联合应用以建立牙周炎模型。单纯全身因素的作用并不能形成牙周炎,局部刺激因素是致牙周炎的关键,全身因素可在局部因素的作用下促使病变加重,加速牙周组织的破坏。
综上所述,实验性牙周炎动物模型是研究牙周炎病因、病理特征的有效手段,也是观察口腔内牙周炎动态变化的工具,为临床牙周病的研究提供科学的实验依据。动物模型的建立对牙周炎的预防和**研究有重要意义。