冷冻保存细胞的冻结与复苏要点
冷冻保存细胞的冻结与复苏要点:慢冻快融
(1)冻结操作过程动作要轻。由于冷冻保存过的细胞变得十分软弱,不只冻结速度要快,而且动作要轻。一般情况
下,冻结后的细胞可直接接种到含彻底成长培育液的细胞培育瓶中直接进行培育(1ml 冻存细胞液加入到 25-30ml
彻底培育液中),24 小时后再用新鲜彻底培育替换旧培育液,以去除 DMSO。假如,细胞对冷冻保护剂特别灵敏,
那么,冻结后的细胞应先经过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含彻底成长培育液的培育瓶中。
(2)快速冻结。冻存细胞从液氮中取出后,应立即放入 37℃水浴中,悄悄摇动冷冻管,使其在 1 分钟内悉数消
融(不要超越 3 分钟)。
特别留意:
(1)冻结时必须留意**,防止冷冻管爆裂。,要带手套,用镊子将细胞冷冻管从液氮中取出,放入 37℃水浴
中。切不行直接用手,避免**。
(2)冷冻管在水浴中冻结时,要将冻存管盖子拧紧,断定拧紧后再投入水浴锅中,留意液面不行超越冻存管盖面,
不然,易发作污染。