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ELISA试剂盒实验测定标本分化

发布时间：2017-03-06

ELISA试剂盒实验测定标本分化

（1）标本溶血
ELISA试剂盒因为各种人为要素致使的标本溶血，均可因红细胞损坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为符号的ELISA测定中，会致使非特异性显色，搅扰测定成果。为战胜上述搅扰效果，标本收集时有必要留意防止溶血。
（2）标本受**污染
因菌体中也许富含内源性辣根过氧化物酶，因而，被**污染的标本同溶血标本相同，亦可发生非特异性显色而搅扰测定成果。
（3）标本保留不妥
ELISA试剂盒在冰箱中保留过久的标本，血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体，在间接法ELISA测定中会致使本底过深、乃至造成假阳性；标本放置时刻过长（如**以上），有时抗原或抗体**活性削弱，亦可呈现假阴性。为战胜上述搅扰，ELISA测定的血清标本宜为新鲜收集；如不能当即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质部分浓缩，散布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行激烈振荡。
（4）标本凝集不全
在没有促凝剂和抗凝剂存在的状况下，正常血液收集后1/2~2h开端凝结，18~24h彻底凝结。临床查验工作中，有时为了争取时刻迅速检查，常在血液还未开端凝结时即强行离心别离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中能够构成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性成果；这类状况于次日复查时因血凝已彻底，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查成果变为阴性。为防止上述搅扰效果，解决的办法*佳是血液标本收集后有必要使其充沛凝结后再别离血清，或标本收集时用带别离胶的采血管或于采血管中参加适当的促凝剂。
（5）标本管中增加物质的影响
ELISA试剂盒抗凝剂（如肝素，EDTA）、酶抑制剂（如NaN3可抑制ELISA体系中辣根过氧化物酶活性）及迅速别离血清的别离胶等均对ELISA测定有必定搅扰效果。
经过以上的剖析和总结，临床查验ELISA测定中呈现假阳性或假阴性等过错的成果，扫除ELISA试剂盒要素和操作要素，再有即是从标本要素进行剖析，并应采纳相应措施扫除搅扰，然后保证检查成果的准确性。

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