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ELISA实验竞争法简介

竞争法(Competitive ELISA)

原理:样本中的抗原及预包被的酶标抗原,竞争性地与固相抗体相结合。样本中的抗原含量越多,结合在固相上的酶标抗原就越少,终显色也越浅。需要注意的是,显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比。

预先将抗原包被在固相载体上,并加入酶标记的特异性抗体。实验时,加入待检抗原(或抗体),如果待检物是抗原,则待检抗原与预先包被在固相载体上的抗原竞争结合酶标抗体;如果待检测物是抗体,则待检抗体就与系统中原有的酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。通过洗涤洗掉被竞争结合的酶标抗体,后加底物显色。

竞争法显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比,且适用于测定只有一个识别位点的小分子物质。

优点:可检测不纯的样品,数据再现性高。

缺点:存在整体敏感性和专一性较差的问题。