常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围广的微生物保存法。
产品名称
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英文名称
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货号
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褶皱链霉菌
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Streptomyces│plicatus
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FS-016419
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拉丁文: Streptomyces│plicatus
提供形式: 冻干物
**等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 产生放线菌素D
培养基: CM0012
生长条件: 28C
存储条件: 真空冷冻干燥
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资源名称: 黑曲霉种属: Aspergillus│niger提供形式: 斜面培养物**等级: 1模式菌株: no应用领域: 酿造白酒、酒精的糖化用菌。培养基: CM0015生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法;定期移植法
资源名称: 乳酸链球菌种属: Lactococcus│lactis subsp. lactis提供形式: 冻干物**等级: 1模式菌株: yes培养基: 0006生长条件: 30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;定期移植法
资源名称: 链霉菌种属: Streptomyces│sp.分离基物: 土壤提供形式: 冻干物**等级: 1模式菌株: no培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
资源名称: 小肠结肠炎耶尔森氏菌种属: Yersinia│enterocolitica提供形式: 冻干物**等级: 2模式菌株: no应用领域: 血清学分群(型) 20培养基: CM0116生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
菌种保藏方法:
1.斜面低温保藏法
将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长完全后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定时间(保藏期)再转接至新的斜面培养基上,生长后继续保藏,如此连续不断。此法简便易行,容易推广,存活率高,故科研和**上对经常使用的菌种大多采用这种保藏方法。
2.石蜡油封藏法
此法是在无菌条件下,将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面(或半固体穿刺培养物)上,石蜡油层高出斜面顶端lcm,使培养物与空气隔绝,加胶塞并用固体石蜡封口后,垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。由于液体石蜡阻隔了空气,使菌体处于缺氧状态下,而且又防止了水分挥发,使培养物不会干裂,因而能使保藏期达1~2年,或更长。但此法不适合厌氧性。
3.砂土管保藏法
适用于产孢子的放线菌、霉菌及形成芽孢的,对于一些对干燥敏感的如奈氏球菌、弧菌和假单胞杆菌及酵母则不适用。砂土管法兼具低温、干燥、隔氧和无营养物等诸条件,故保藏期较长、效果较好,且微生物移接方便,经济简便。它比石蜡油封藏法的保藏期长,约1~10年。
4.麸皮保藏法
此法以麸皮作为载体,吸附接入的孢子,然后在低温干燥条件下保存。适用于产孢子的霉菌和某些放线菌,保藏期在1年以上。因操作简单,经济实惠,工厂较多采用。
5.冷冻真空干燥保藏法
简称冻干法,通常采用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中,再在低温下快速将含菌样冻结,并减压抽真空,使水升华将样品脱水干燥,形成完全干燥的固体菌块。并在真空条件下立即融封,造成无氧真空环境,后置于低温下,使微生物处于休眠状态,而得以长期保藏。常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。
6.液氮超低温保藏法
以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂,在液氮超低温(-196℃)下保藏。其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温,并在降到低温之前,使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来,以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。此法操作简便、高效、保藏期一般可达到15年以上,是目前被公认的有效的菌种长期保藏技术之一。
可溶性Endoglin(sENG/sCD105)ELISA试剂盒 CP(剧品)2,6-二氟-4-羟基苯 98%天青II
可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒黄磷 CP(剧品)2,4-二甲酸 98%天青A
可溶性CD44变体9(sCD44-v9)ELISA试剂盒 AR,99.5%(剧品)L-苹果酸二甲酯 98%三氯生
可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 CP(剧品)2,2-二甲基丁酸 98%刃天青/树脂天青/刃天青钠
可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒 Standard for GC, ≥99.5% (GC)3,3-二甲基烯酸 98%天青石蓝
可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒2,6-吡啶二羰酰氯 96%2,5-二甲酸 98%天青 B 曙红
可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒亚硝基铁 CP3,5-二甲基-4-吡唑 97%利马前列素
可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)ELISA试剂盒醌氢醌 97%2,5-二甲基溴苯 98%天青II曙红
可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒磷钼酸钠,水合 ARN-基二硫代亚碳酸二甲酯 90%菲律宾菌素;非律平;Filipin
可溶性CD163分子(sCD163)ELISA试剂盒次氯酸钠溶液 AR,6-14% active chlorine basisL-(-)-二(对甲酰) 97%瑞舒伐他汀/罗苏伐他汀游离酸
可溶性CD146分子(sCD146)ELISA试剂盒次氯酸钠 CP,available chlorine 5.5 %3-(二甲氨基)烯酸乙酯 98%苏丹I/溶剂黄14
可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒次氯酸钠溶液 ACS,available chlorine 5.00 %3-氨基巴豆酸乙酯 99%苏丹II/苏丹2/溶剂橙7
可溶性CD105(sCD105)ELISA试剂盒硫代乙酸钠 AR,80.0%硫代草氨酸乙酯 95%苏丹Ⅲ/III/溶剂红23
可溶性CD100(sCD100)ELISA试剂盒硫代乙酸钠 BR乙酸乙酯 98%苏丹Ⅳ/4/溶剂红24
颗粒体蛋白(GRN)ELISA试剂盒硫代乙酸钠 98%二乙酯 97%油红O/溶剂红27/5B
颗粒溶素(GNLY)ELISA试剂盒亚硝基铁化钠 AR,99.0%3-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)苯甲酸 97%G/溶剂红1/油红113
褶皱链霉菌烟曲霉
种属: Aspergillus fumigatus Fresenius
提供形式: 冻干管,斜面培养物
**等级: 1
模式菌株: no
培养基: Czapek's 琼脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。
传代方法: ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。
②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件: 25-28℃,好氧
肠侵袭性大肠埃希氏菌
种属: Escherichia│coli EIEC
分离基物: 腹泻病例粪便标本
提供形式: 冻干物
**等级: 2
模式菌株: no
培养基: CM0002
生长条件: 37℃