冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品名称
|
SW520/5FU细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
FS-016433
|
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇��解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业背景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
相关热销产品:
甘露糖凝集素受体(MBLR)ELISA试剂盒1-萘酚 分析标准品滨蒿内酯 分析标准品,≥98%无水碳酸钠
甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒氮酮 97%6,7-二甲氧基 98%D-果糖
甘露糖(MN)ELISA试剂盒氮酮 药用级6,7-二羟基 分析标准品,≥98%N,N,N',N'-四甲基乙二
甘露糖(Mannose)ELISA试剂盒熊果苷 99%薯蓣皂甙 分析标准品,≥98%核黄素磷酸钠水合物
甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒熊果苷 分析标准品,≥99%表儿茶素没食子酸酯 分析标准品,≥98%溴化乙锭溶液,10 mg/ml
甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽1(C4/C2 RA反应因子的激活因子)(MASP1)ELISA试剂盒戴斯-马丁试剂 96%表儿茶素没食子酸酯 98%核苷酸胶体染料
甘胆酸(CG)ELISA试剂盒曲酸 99%芥酸 分析标准品D-葡萄糖无水
甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒酸 98%辛夷脂素 分析标准品,≥98% 吉非替尼
钙转运ATP酶2C型成员1(ATP2C1)ELISA试剂盒酸 99.5%,用于糠衍生物的比色分析及化物测定6-姜烯酚 分析标准品,≥90%EDTA,乙二四乙酸
钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒噻吩甲酰三氟酮 98.0%8-姜酚 分析标准品,≥95%咪唑
钙依赖性胞浆型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒DL-精氨酸盐酸盐 98%黄豆黄素 分析标准品,≥97%L(+)-阿拉伯糖
钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒N-乙酰-DL-色氨酸 98%黄豆黄苷 分析标准品,≥98%(HPLC)去离子甲酰
钙调素特异抗体(CAM-ab)ELISA试剂盒L-a-氨基己二酸 98%银杏内酯B 分析标准品,≥99%(HPLC)石蜡油
钙调素(CAM)ELISA试剂盒D-氨酸甲酯盐酸盐 98%银杏内酯 C 分析标准品,≥99%乙酸
钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒N-乙酰-L-亮氨酸 98%甘草次酸(β型) 分析标准品,≥98%无水乙酸钠
钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒N-乙酰-DL-亮氨酸 98%甘草次酸(β型) 97%氯化
SW520/5FU细胞解淀粉类芽孢杆菌
种属: Paenibacillus│amylolyticus
分离基物: 土壤
提供形式: 冻干物
**等级: 1
模式菌株: yes
应用领域: 模式菌株
培养基: 0002
季也蒙毕赤酵母
种属: Pichia│guilliermondii
提供形式: 冻干物
**等级: 1
模式菌株: no
培养基: 0013
生长条件: 25-28℃
存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报