UMR-85细胞

实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

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细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。 

端粒重复序列结合因子2(TERF2)ELISA试剂盒 ≥97% (HPLC)2,4-二羟基苯甲酸甲酯 98%焦磷酸钠(AR)

端粒重复序列结合因子1(TERF1)ELISA试剂盒防己诺林碱 分析标准品，>98% 3,4-二羟基苯甲酸 ≥97.0% (T)碳酸氢铵(AR)

端粒酶逆转录酶(TERT)ELISA试剂盒银杏酸(C17:1) 分析标准品，≥98%3,4-二羟基苯甲酸 分析标准品, ≥97.0% (HPLC)氯化铵(AR)

端粒酶(TE)ELISA试剂盒高三尖杉酯碱  分析标准品，≥98%香草酸 98%水杨酸(AR)

端粒保护蛋白1(POT1)ELISA试剂盒烟碱 分析标准品（剧品）3-氨基苄 98%甲壳素；几丁质

蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3(M-AChR M3)ELISA试剂盒原碱   98%对氨基苯 98%辅酶 A

蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒硫酸奎尼丁 98%邻氨基苯 98%多效唑

性休克综合征素1(TSST-1)ELISA试剂盒茄尼 96%对 97%酸钠十水(AR)

叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒雷公藤内酯甲  分析标准品，98%四氢吡喃酮 97%硫酸联氨(AR)

凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒2-过氧化丁酮 >52%(GC)2,5-二羟基苯甲酸 98%多酚氧化酶

凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒2-过氧化丁酮 CP3,5-二羟基苯甲酸 97%硫酸铜五水(AR)

凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒丁酸酐 98%一氯化 ARN-乙酰-D-氨基葡萄糖

凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒邻 99%一氯化 ACS无水三氯化铁(AR)

凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒邻 分析标准品，99.5%三氯化 AR,97.0%硫酸锰一水(AR)

凋亡相关因子(Fas)ELISA试剂盒3,5-二酚 98%2,3-二氯苯 98%氯化铷(分子生物学级)

凋亡相关蛋白激酶(DAPK)ELISA试剂盒独石氧化铌 电子级99.98%N-氨乙基哌 99%多聚赖氨酸
UMR-85细胞龟分支杆菌龟型亚种

种属: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae

提供形式: 冻干物

**等级: 3

模式菌株: no

应用领域: 研究

生长条件: 37

存储条件: 真空冷冻干燥法

萎缩芽孢杆菌

种属: Bacillus│atrophaeus

提供形式: 冻干物

**等级: 1

模式菌株: no

应用领域: Hot air and ethyleneoxide gas;sterilization contro

培养基: 0002

生长条件:
培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

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