实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
大鼠**成纤维细胞
|
详见说明书
|
FS-016487
|
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
17羟皮质类固(17-OHCS)ELISA试剂盒倍硫磷 分析标准品溴乙酰二甲缩, 含0.2 % 碳酸稳定剂, 97%四氟酸锂(>98%,BR)
17-α-羟化酶(17-α-OH)ELISA试剂盒倍硫磷标准溶液 1.00mg/ml乙酸镁,四水 AR ,99.0%L-苏糖酸钙(>99%,BR)
16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒倍硫磷标准溶液 100μg/ml,u=4%硫酸镁，七水 AR,99.0%L-酪氨酸二钠盐(>98%,BC)
15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒倍硫磷标准溶液 10μg/ml,u=6%硫酸镁，七水 用于分子生物学和植物培养级，≥99.0%鲁米诺钠(>98%,BS)
15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)ELISA试剂盒气 99%硫酸镁，七水 GR,99.5%溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)ELISA试剂盒正戊 98%硫酸镁，七水 SP溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
14-3-3蛋白(14-3-3 pro)ELISA试剂盒二异辛 99%硫酸镁，七水 99.99% metals basis柠檬酸镁九水(>98%,BR)
示蛋白胨（Proteose Peptone）苦参2-(羟甲基)-1-甲叔丁酯MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
谷氨钠 (LP0124)氧化苦参（苦参素）2-(羟甲基)-1-甲叔丁酯CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 烟型乙酰胆受体α7(多肽)
一号植物蛋白胨 Vegetable Peptone 咖啡2-(羟甲基)-1-甲叔丁酯Nanog fragment 干关键蛋白(多肽)
植物蛋白胨肉汤 Vegetable Peptone Broth硫辛2,4-二甲Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 纳曲偶联牛血清白蛋白：纳曲偶联血蓝蛋白
植物蛋白胨磷盐肉汤 (VG0200)盐氨基葡萄糖2,4-二甲NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核体组装蛋白1（多肽）
大豆蛋白胨（GMO-Free Soya Peptone）罗通定3,4-Difluoro-2-Methylbenzoic AcidN-cadherin N-钙粘附分子抗原
Nutrient Agar 营养琼脂落新妇苷3,4-Difluoro-2-Methylbenzoic AcidE-cadherin E-钙粘附分子抗原
Nutrient Agar Tablets 营养琼脂片剂芦丁1-叔丁氧羰基-4-乙Nephrin Protein 去氧肾上腺素
麦康凯肉汤 (CM0005)雷公藤甲素1-叔丁氧羰基-4-乙Neurocan 神经粘蛋白抗原
麦康凯琼脂 (CM0007)雷公藤乙素1-叔丁氧羰基-4-乙NF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神经纤维瘤抗原
蛋白胨水Peptone Water雷公藤红素Perifosine (KRX-0401)NFATc1 活化T核因子1蛋白
LAB-LEMCO( ) 肉汤 Lab-Lemco Broth雷公藤内酯甲1H-苯并咪唑-5-羧phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷化核因子/磷化k基因结合核因子抗原
LAB-LEMCO( ) 琼脂 Lab-Lemco Agar木犀草素1H-苯并咪唑-5-羧NF-KapBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB) 核因子50/κ基因结合核因子50抗原
酵母提取物琼脂(CM0019)木犀草苷1H-苯并咪唑-5-羧NGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神经元素3抗原
牛奶琼脂 (CM0021)没食子3-溴-5-甲氧基苯甲NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌相关基因6（多肽）
巯基醋盐培养基(Brewer) (CM0023)蒙花苷3-溴-5-甲氧基苯甲NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗原
改良爱德华培养基(CM0027)莽草1,3,5-三(4 - 羟基苯基)苯NKA(Neurokinin A) 神经激肽A抗原
2%亮绿胆汁肉汤(CM0031)芹菜素4-溴-1,3,5-基吡唑NKG2A/CD159a/KLRC1 NK受体2A/自然杀伤活化性受体2A抗原
Kligler 铁琼脂 (CM0033)青藤4-溴-1,3,5-基吡唑NKG2D(natural killer cell group 2D) NK受体/自然杀伤活化性受体
脱氧胆盐柠檬盐琼脂 (CM0035)齐墩果4-溴-1-甲基-1H-吡唑Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 肿瘤转移抑制基因抗原
沙保氏葡萄糖琼脂 (CM0041)七叶皂苷钠4-溴-1-甲基-1H-吡唑Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A) 肿瘤抑制基因抗原
MRVP 培养基 (Clarks and Lubs 培养基) (CM0043)木糖2,3-二羟基喹喔啉Nogo-B/A 轴索过度生长抑制因子-B/A抗原
琼脂片剂 (3号琼脂)(CM0049)盐育亨宾2,3-二羟基喹喔啉NOS-2 peptide 一氧化氮合成酶-2多肽抗原
尿素琼脂基础 (Christensen 琼脂基础) (CM0053)烟乙(1S,2S)-N,N'-双[(Ｒ)-2-羟基-2'-苯基-1,1'-联萘基-3-基亚甲基]-1,2-二苯基乙二胺合锰(III)Notch1/MOTC(Neurogenic locus notch homolog protein 1) 跨膜受体蛋白Notch-1抗原
血琼脂基础 (CM0055)金雀花(野靛)N-芴甲氧羰基-O-(苄基磷酰基)-L-丝氨NADPH peptide 还原型辅酶Ⅱ抗原
麦芽浸膏肉汤 (CM0057)秋水仙N-芴甲氧羰基-O-(苄基磷酰基)-L-丝氨proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide) 促尿钠排泄肽前体C抗原
麦芽浸膏琼脂 (CM0059)薯蓣皂苷元N-芴甲氧羰基-O-(苄基磷酰基)-L-丝氨NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2) 神经肽Y受体2（多肽）
蛋白胨水 (Andrade)薯蓣皂苷二乙烯三胺五甲叉膦NPY1R (neuropeptide Y1 receptor) 神经肽Y1受体抗原
Nutirent Broth No.2 2 号营养肉汤原薯蓣皂甙4-氨基-3--5-甲NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l) 醌氧化还原酶抗原
伊红美兰琼脂 (Levine 培养基) (CM0069)蛇床子素4-氨基-3--5-甲NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) 谷氨受体1（多肽）
西红柿汁琼脂 (CM0113)延胡索乙素2--6-甲氧基吡-4-羧OXR (Orexin receptor) 食欲素受体(多肽)
3号麦康凯琼脂(麦康凯琼脂(US 配方)) (CM0115)羊藿苷5-基吲哚P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潜能相关蛋白抗原
大鼠**成纤维细胞碳琼脂基础 (CM0119)柚皮苷5-基吲哚P19ARF p19ARF抑癌基因抗原
大鼠**成纤维细胞胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂 (CM0127)柚皮素5-基吲哚phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷化丝裂原活化蛋白激酶p38抗原
Tryptone Soya Broth（Soybean Casein Digest Medium USP）胰蛋白胨大豆肉汤原花青素6-基吲哚MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原
Tryptone Soya Agar 胰蛋白胨大豆琼脂现货岩白菜素6-基吲哚P53(wt-p53) 肿瘤抑制基因抗原（野生型P53）
乳糖肉汤 (CM0137)盐青藤6-基吲哚Mtp53(Mutant type p53) 突变型P53抗原
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报