人偏肺病毒荧光PCR检测试剂盒

产品名称：人偏肺病毒荧光PCR检测试剂盒
产品货号:FS-01P99969
操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

产品特点：

1、公司产品仅用于科研不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3～5μg mtDNA。

注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。

产品组成:

使用方法:

一:培养细胞预处理

1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。

2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。

二:组织细胞预处理

3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小*),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。

三:血液预处理

4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。

5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)四:mtDNA提取

5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。

6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。

7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。

9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。

10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。

11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。

13. 重复上步1次。

14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。

15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。

16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。

18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。

19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。下列是公司正热销的产品：
Ai-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC 荧光su标记兔抗人、大、小鼠等磷suan化钙/钙调su依赖蛋白激mei2α抗体IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rabbit Ai-Guinea IgM/Gold 金标记兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies： 2ml

凝血mei原mei抗体/纤维介su蛋白/前凝血su抗体 Ai-fgl2 0.1ml

Goat Ai-Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOPNL 英文名称： 胚胎干细胞相关蛋白FOPNL抗体 0.2ml

Rhesus aibody Rh phospho-STAT6(Thr645) 磷suan化信号转导和转录激活因子6抗体  0.1ml

Rabbit Ai-Guinea IgM/Gold 金标记兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies： 2ml

MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多药耐药相关蛋白5抗原Multi-class aibodies： 0.5mg

Ai-Annexin I 膜粘连蛋白 I抗体Multi-class aibodies： 0.1ml

Rhesus aibody Rh phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115) 磷suan化Bcl-xL蛋白抗体  0.1ml

品名  备注

VEGF 英文名称： 血管内皮生长因子抗体 0.1ml

DNase gamma 英文名称： 脱氧核糖核suanmeiγ抗体 0.2ml

Ai-Annexin I 膜粘连蛋白 I抗体Multi-class aibodies： 0.1ml

SLK 英文名称： 酪suan蛋白激meiFyn(同步原癌基因)抗体 0.2ml

EST1A 英文名称： 端粒mei结合蛋白EST1A抗体 0.2ml

微管蛋白抗体 Ai-Tubulin-α 0.1ml

Ai-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 荧光su标记磷suan化酪氨suan激meiA抗体IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rhesus aibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 磷suan化胰岛su受体β抗体  0.1ml

Calpain 1 钙蛋白mei(多肽)Multi-class aibodies： 0.5mg
人偏肺病毒荧光PCR检测试剂盒乙suan（标准品）氟尼辛葡 标准品  CAS号：100mg组织甘肽S转移mei（GSH ST）总活性mei动力比色法定量检测试剂盒

36%乙suan（标准品）伏草隆 标准品  CAS号：2164-17-2 250mg血液甘肽S转移mei（GSH ST）总活mei动力性比色法定量检测试剂盒

乙suan（HPLC,≥99.9%）FLUOROIMIDE 41205-21-4 标准品  CAS号：10ng/ul 10ml微粒体甘肽S转移mei（GSH ST）活性mei动力比色法定量检测试剂盒

Amberlite® IRP-69阳离子交换树脂喹唑菌tong 标准品  CAS号：136426-54-5 100mg胞浆甘肽S转移mei（GSH ST）活性mei动力比色法定量检测试剂盒

苊烯（标准品） 氟草烟 标准品  CAS号：69377-81-7 100mg 甘肽-S-转移mei（GSH-ST）活性终点比色法定量检测试剂盒

二乙烯基苯与乙烯基苯磺suan钠的聚合物氟哇唑 标准品  CAS号：85509-19-9 100mg甘肽过氧化物mei（GSH PX）活性mei动力比色法定量检测试剂盒

二苯胍（标准品）氟硫灭 标准品  CAS号：106917-52-6 100mg血液甘肽过氧化物mei（GSH PX）活性mei动力比色法定量检测试剂盒

13-乙酰基-9-羟基巴丁III（标准品） 氟噻乙草酯 标准品  CAS号：117337-19-6 100mg组织甘肽过氧化物mei（GSH PX）活性mei动力比色法定量检测试剂盒