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细胞简介:
兔海绵体内皮细胞分离自海绵体组织;海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构,它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面,仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大,平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来,从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此,比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。
商品属性:
产品名称
兔海绵体内皮细胞
种属
兔
组织来源
海绵体
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号
A01X2131
细胞形态
内皮细胞样
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁
方法简介:
实验室分离的兔海绵体内皮细胞采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔海绵体内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔海绵体内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
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信息
原代细胞的培养条件:
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养 a 细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性 b 细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L。 c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。 d 胎牛血清浓度为10%-80%。 e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。 f 在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。 g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液 h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。 ② 悬浮细胞的培养要求 a 原代培养时要尽量去除红细胞 b 短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行 c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验。 d 长期培养时,细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长。 f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次 g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。