(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
乳腺组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
兔原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
兔乳腺成纤维细胞分离自乳腺组织；乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间，浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间，形成许多间隔，这些纤维结缔组织对起固定作用，而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
公司实验室分离的兔乳腺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的兔乳腺成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa分析检测试剂盒
elisa分析检测试剂盒
通用型精（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
双参数细胞周期G0期流式细胞分析试剂盒
X线胶片 100张
小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)elisa检测试剂盒
大鼠白介素35(IL-35)elisa检测试剂盒
全组织酸性磷酸酶活性染色试剂盒
人β胶原交联(bCTx)elisa检测试剂盒
热休克蛋白70蛋白7抗体 HSPA7
溶血磷脂酸受体蛋白1/EDG2抗体 LPA1
IV型胶原蛋白/4型胶原蛋白/胶原蛋白4抗体 Collagen IV
KIAA1712蛋白抗体 KIAA1712
真核翻译起始因子3亚基L/eIF3e蛋白抗体 IF3EI
植烷酰辅酶A羟化酶2抗体 HPCL2
钙调蛋白OCM2抗体 OCM2
肝细胞粘附分子2抗体 HEPACAM2
细胞色素P450 4X1抗体 CYP4X1
细胞周期调控因子14A抗体 Cdc14A
ZDHHC24蛋白抗体 ZDHHC24
β-葡萄糖脑苷脂酶重组兔单克隆抗体 GBA
ASH1蛋白抗体 ASH1L
BEND4蛋白抗体 BEND4
跨膜蛋白SEMA3D抗体 Semaphorin 3D
磷酸化c-fos抗体 Phospho-c-Fos (Thr325)
大鼠皮质醇结合球蛋白(CBG)elisa检测试剂盒
兔乳腺成纤维细胞大鼠白介素35(IL-35)elisa分析检测试剂盒
IL-35 ELISA Kit
人基质γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)elisa分析检测试剂盒
HumanMGPELISAKit
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法