(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
脑
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
兔原代细胞
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
悬浮
细胞形态
球形
细胞简介:
兔神经干细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新,并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是,在脑脊髓等所有神经组织中,不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种,它具有其它所有干细胞的基本特征:具有自我维持和自我更新能力,具有多种分化潜能,具有分化为本系统大部分类型细胞的能力,这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生,对损伤和具有反应能力。神经干细胞在、损伤状态下具有增殖、迁移,并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力,已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点,体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4d后,可形成神经球,神经球在培养基中呈悬浮生长,予以更换半量培基,1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液,将部分细胞接种到新的培养瓶中,2×105个细胞/瓶,每7-10d传代1次,每隔3d离心更换半量培养基1次,培养条件不变。
方法简介:
实验室分离的兔神经干细胞采用胰蛋白酶消化后差速贴壁,结合神经干细胞培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔神经干细胞经Nestin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
培养基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:球形
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶,Accutase
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔神经干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
大鼠肝X受体α(LXRα)elisa检测试剂盒
Caspase 9 活性检测试剂盒20T
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa检测试剂盒
鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa检测试剂盒免费代测
人体肿瘤β-catenin突变巢式分析试剂盒
小鼠活化素A(ACV-A)elisa分析检测试剂盒
大鼠丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒
石蜡切片磷脂皮尔斯(Pearse)直接染色试剂盒
人白介素17B(IL17B)elisa检测试剂盒
CULLIN抗体 C10orf46
DNA甲基转移酶-3α抗体 Dnmt3a
磷酸化白介素2受体β(CD122)链抗体 phospho-IL2 Receptor beta (Tyr364)
磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体 Phospho-SATB1 (Ser47)
半乳糖凝集素3单克隆抗体 Galectin 3
丙型肝炎病毒NS4B(65kDa)抗体 Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase
线粒体核糖体蛋白L4抗体 MRPL4
相互作用蛋白FHL2抗体 FHL2
NKR-P1G抗体 Klrb1
p40蛋白抗体 p40/RABEPK
三磷酸腺苷受体受体P2X2抗体 P2X2
神经生长因子诱导蛋白抗体 VGF
核蛋白9 / Ran结合蛋白M单克隆抗体 RANBP9
核糖体合成蛋白BOP1抗体 BOP1
周期素G2抗体 CCNG2
转运蛋白SEC23抗体 SEC23
?石蜡切片组织COLLAGEN III蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
兔神经干细胞大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)elisa分析检测试剂盒
SHC1 ELISA kit
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析检测试剂盒
Casp-12ELISAKit
原代细胞的分离方法:
一、悬浮细胞的分离方法