(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
肾
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
兔原代细胞
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
细胞简介:
兔肾小管上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能,**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏的一项重要技术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原,这说明肾小管上皮细胞参与肾损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质的发病机制和筛选的研究中是非常重要的。
方法简介:
实验室分离的兔肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肾小管上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肾小管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
鸡Toll样受体4(TLR4)elisa分析检测试剂盒
MITD1蛋白抗体
MITD1
1号染色体开放阅读框31抗体
C1orf31
小鼠饥饿(GHRL)elisa分析检测试剂盒
大鼠补体C5a(C5a)elisa检测试剂盒
细胞磷脂皮尔斯(Pearse)染色试剂盒
人白介素18结合蛋白(IL-18BP)elisa检测试剂盒
磷脂爬行酶3抗体
PLSCR3
皮肤T细胞虏获趋化因子抗体
CCL27
转录因子Tbx3抗体 Anti-TBX3
腺苷单磷酸活化蛋白激酶γ2抗体 Anti-PRKAG2/AMPKγ2
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶18 Anti-PLK4/STK18
钠碘转运体蛋白8抗体 Anti-SLC5A8
Cy5标记的兔抗人IgG H&L F(ab')2
Rabbit Anti-Human IgG F(ab')₂ / Cy5
减数分裂内切酶EME1抗体
EME1
人白介素17F(IL-17F)elisa分析检测试剂盒
IL-17FELISAKit
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒
PorcineOsteocalcinELISAkit
猴子N端前脑钠素(NT-proBNP)elisa分析检测试剂盒
兔肾小管上皮细胞Hermansky-Pudlak综合征蛋白3抗体
HPS3
细胞分裂周期蛋白16抗体
APC6
原代细胞的分离方法:
一、悬浮细胞的分离方法