(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
胰腺组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
兔原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
兔胰腺星状细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星状细胞（PSC）是胰腺纤维化的主要效应细胞，PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴，并表达Desmin蛋白，活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）。PSC具有静息态与激活态两种，并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色，阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现，原代分离的细胞培养6d，胞浆中仍可见明显的脂滴，传代后，橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。细胞化学染色显示，细胞接种24h仍然表达Desmin，48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA，随着培养时间的增长和传代次数的增加，细胞表达alpha-SMA，而不再表达Desmin，说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程，至培养第6d大多数细胞激活，传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型，目前研究发现：胰腺受损时，在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化，导致细胞形态、功能发生变化，促使基质增生、胶原蛋白的大量**及不规则沉积。
方法简介：
公司实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)elisa检测试剂盒
大鼠B细胞瘤因子2(Bcl-2)elisa检测试剂盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa检测试剂盒
牛白介素8(IL-8)elisa检测试剂盒
体液单胺氧化酶A型（MAO－A）活性化学发光法定量检测试剂盒
小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa检测试剂盒
大鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)elisa检测试剂盒
植物β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒
人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)elisa分析检测试剂盒
EPB41L4A蛋白抗体 EPB41L4A
FAM26E蛋白抗体 FAM26E
磷酸化外纺锤体极样蛋白1抗体 phospho-Separase (Ser1073)
磷酸化整合素β1（CD29）抗体 phospho-Integrin beta 1 (Tyr783)
促卵泡刺受体抗体 FSH receptor
蛋白激酶A2抗体 AKAP2/PALM2
锌指蛋白449抗体 ZNF449
锌指蛋白787抗体 ZNF787
PE标记人CD11c单克隆抗体 human CD11c/PE
PHD指蛋白21A抗体 PHF21A
视黄醛结合蛋白1抗体 RLBP1L1
瞬时受体电位蛋白12抗体 TRP12/TRPV4
环指蛋白31抗体 RNF31
肌浆/内质网钙ATP酶2抗体 Serca2/SERCA2 ATPase
组蛋白H1.2重组兔单克隆抗体 Histone H1.2
19号染色体开放阅读框61抗体 C19orf61
载玻片细胞线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
兔胰腺星状细胞人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)elisa分析检测试剂盒
组织样品组织B（CATHEPSIN B）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)elisa检测试剂盒
大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)elisa检测试剂盒
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法