(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
附睾
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
小鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%��CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
细胞简介：
小鼠附睾上皮细胞分离自附睾组织；附睾（Epididymis）是一个由曲折、细小的管子构成的器官，一端接着输精管（Ductusdeferens），一端接着睾丸（Testis）的曲细精管，具体结构主要包括输出小管和附睾管。附睾紧贴睾丸的上端和后缘，可分为头、体、尾三部。精子离开睾丸后通过输出小管进入附睾。附睾具有暂存精液并分泌附睾液营养精子的功能，以促进精子的进一步成熟附睾的功能是暂存精子，促进精子的进一步成熟。精子在附睾内获得运动能力，总共停留8～17天，终达到功能上的成熟。在这个过程中，精子除了自身的因素，还受到附睾微环境的影响，这包括了一系列的物理、化学变化和精子形态的改变。可以说，附睾微环境正常稳定是附睾发挥促成熟这一功能的必要条件。若附睾的功能发生异常，精子则不能成熟，引起不育。附睾上皮含有主细胞、基细胞、亮细胞等几种类型细胞。基细胞，其顶部离附睾管腔有一定距离，在附睾各部分，其形态没有差别，一般认为是贮备细胞；另一种主细胞，是维持附睾生理功能的物质基础，在各区段的主细胞形态结构差别很大，这也反映出各区段的生理功能的差异。除上皮细胞外，附睾的管壁组织结构也有规律性的变化，附睾管起始段平滑肌有自发地节律性收缩，而尾部平滑肌就没有这种特点，仅在射精一瞬间出现强烈的节律收缩。作为负责提供适合精子成熟微环境的附睾，具有活跃的分泌与吸收功能。其中，附睾上皮的电解质和水分的转运，对保持附睾内合适的离子浓度和酸碱度，为精子成熟提供适宜的环境起着相当重要的作用。睾丸的支持细胞每天能产生大量睾网液，如一只公羊每天约能分泌40毫升睾网液，而从附睾排出的只不过几百微升，也就是说睾丸分泌液有99%被附睾上皮重新吸收回体内。动物实验表明，结扎输精管时睾丸不会肿胀，但若结扎睾丸输出小管，睾丸天就会肿胀，这就充分证实了附睾存在着强有力的吸收功能，但是重新吸收的意义尚不清楚。体外培养附睾上皮细胞对精子的发育、成熟，不孕不育，附睾生理基础功能研究具有重要意义。
方法简介：
实验室分离的小鼠附睾上皮细胞采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的小鼠附睾上皮细胞经PCK荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
小鼠附睾上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳凞︘凞
ColⅣELISAKIT
Hermansky-Pudlak综合征蛋白3抗体
HPS3
细胞分裂周期蛋白16抗体
APC6
鱼褪黑素(MT)elisa检测试剂盒
大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa分析检测试剂盒
细胞甘油二脂酰激酶（DAG KINASE）酶连续循环比色法定量检测试剂盒
人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)elisa分析检测试剂盒
MAP7D3蛋白抗体
MAP7D3
桥粒糖蛋白4抗体
Desmocollin 4
沉默调节蛋白1抗体 Anti-SIRT1
鸟嘌呤核苷酸交换因子抗体 Anti-RCBTB1/CLLD7
核仁蛋白C23抗体 Anti-Nucleolin/C23
信号通路Wnt5a抗体 Anti-WNT5A
TIP30蛋白抗体
TIP30
死亡因子4样蛋白2抗体
Mortality Factor 4 like 2
脱髓鞘相关蛋白SH3TC2N抗体 Anti-SH3TC2
修补相关蛋白PTCHD3抗体 Anti-PTCHD3
亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体 Anti-PPIG
干燥综合征相关蛋白2抗体 Anti-TROVE-2/SSA2
FITC标记小鼠IgG（型对照)
小鼠附睾上皮细胞核蛋白相互作用蛋白1抗体
KPNA1
BATF2蛋白抗体
BATF2
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法