(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
冠状动脉
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
小鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
小鼠冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分，细胞膜上分布着多种离子通道，如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道；它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化，调节血管平滑肌的收缩及舒张功能，此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此，原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞，对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠核受体亚家族1D组成员2(NR1D2)elisa检测试剂盒
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500T
小鼠过敏/补体片断4a(C4a)elisa检测试剂盒
微量琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 50次
石蜡切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）摩罗利 （mallory）染色试剂盒
小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)elisa分析检测试剂盒
大鼠激活素A(ACVA)elisa检测试剂盒
细胞PDGFRβ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒
腺衍生血管内皮生长因子抗体 Prokineticin 1
凝溶胶蛋白抗体 Gelsolin
FOXJ2蛋白抗体 FOXJ2
GTP结合蛋白SAR1B抗体 SAR1B
胰岛素促进因子重组兔单克隆抗体 PDX1
乙酰化组蛋白H3抗体 Histone H3 (acetyl K9)
多巴胺受体D1重组兔单克隆抗体 DRD1
法尼基转移酶β-亚单位抗体 FNTB
突触核膜蛋白2抗体 Nesprin 2
微管蛋白β辅助因子D抗体 Beta tubulin cofactor D
RSPH3蛋白抗体 RSPH3
SH3BGRL2蛋白抗体 SH3BGRL2
8号染色体开放阅读框74抗体 C8orf74
AF594标记的单体樱桃红荧光蛋白标签抗体 mCherry, Alexa Fluor 594 conjugated
钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体 KCNQ1
卷曲螺旋结构域蛋白114抗体 CCDC114
冰冻切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
小鼠冠状动脉平滑肌细胞Caspase 9 活性检测试剂盒100T
小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)elisa检测试剂盒
鸡甘丙肽(GAL)elisa分析检测试剂盒
细胞培养液总脂蛋白（Total L-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法