(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
胰腺组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
小鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
小鼠胰腺星状细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星状细胞（PSC）是胰腺纤维化的主要效应细胞，PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴，并表达Desmin蛋白，活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）。PSC具有静息态与激活态两种，并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色，阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现，原代分离的细胞培养6d，胞浆中仍可见明显的脂滴，传代后，橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。细胞化学染色显示，细胞接种24h仍然表达Desmin，48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA，随着培养时间的增长和传代次数的增加，细胞表达alpha-SMA，而不再表达Desmin，说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程，至培养第6d大多数细胞激活，传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型，目前研究发现：胰腺受损时，在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化，导致细胞形态、功能发生变化，促使基质增生、胶原蛋白的大量**及不规则沉积。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠胰腺星状细胞采用胶原酶制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
MouseKlothoELISAKit
石斑鱼卵黄蛋白原(VTG)elisa分析检测试剂盒
VTG ELISA Kit
人白介素-21(IL-21)elisa分析检测试剂盒
HumanIL-21ELISAKit
细胞/组织线粒体DNA萃取试剂盒
大鼠细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)elisa检测试剂盒
细胞中链酮脂酰硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量检测试剂盒
NAD激酶NADK测试盒 50T/24样 比色法
LSM4蛋白抗体
LSM4
细胞色素P450 A43抗体
CYP3A43
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 Anti-STSL/ABCG8
环指蛋白130抗体 Anti-RNF130
钠钾离子转运蛋白1抗体 Anti-NKCC1
锌指蛋白ZBTB6抗体 Anti-ZBTB6/ZNF482
精子细胞成熟蛋白1抗体
SPEM1
微小染色体维持缺陷蛋白9抗体
MCM9
SUGT1蛋白抗体 Anti-SUGT1
磷酸化丙酮酸脱氢酶α1抗体 Anti-phospho-PDHA1(Ser293)
血小板源性生长因子A抗体 Anti-PDGF-A
Toll样受体2抗体 Anti-TLR2/CD282
PE-Cy5.5标记大鼠IgG（型对照)
小鼠胰腺星状细胞高迁移率族蛋白N4抗体
HMGN4
植物生长ABP1抗体
ABP1
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法