货号：74004 痕量样品总RNA提取试剂盒 (50)
英文名称：RNeasy Micro Kit (50) 中文名称：痕量样品总RNA提取试剂盒 (50) 品 牌：Qiagen 货 号：74004 从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA
数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
即用型RNA在各种下游应用中表现良好
微量起始样本， RNA产量稳定
无需酚/氯仿抽提
无需CsCl梯度离心，无需LiCl或乙醇沉淀
RNeasy Micro Kit专用于从微量细胞和组织样本中纯化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。可在QIAcube全自动核酸分析仪上应用RNeasy Micro Kit实现RNA纯化全自动化。处理更大的样本，可使用RNeasy Mini Kit（离心柱结合能力为100 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（离心柱结合能力为1 mg RNA）或RNeasy Maxi Kit（离心柱结合能力为6 mg）。
特点
参数
应用
PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积
10–14 µl
规格
Spin column
主要样本类型
Tissue, cells
处理
Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
RNA
样本量
<5 mg
技术
Silica technology
每次运行或制备时间
30–40 minutes
产量
Varies
性能
RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA，且重复性好。从少量细胞，包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA（参见Reliable RNA isolation from a single cell、Highly reproducible yields for sensitive applications和High-quality total RNA from fine needle aspirates）。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到*大的敏感度，如real-time RT-PCR（参见Efficient on-column removal of genomic DNA）。
原理
RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA，如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞（如FACS筛选细胞）。处理显微切割FFPE组织，我们推荐使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱独特的设计可确保*小的洗脱体积，小至10 µl，实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内，提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用，无酶抑制。
操作流程
RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA。先对样本（<5 mg组织或<5 x 105个细胞）进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱，RNA（至多45 µg）结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase，确保简单、高效的柱上基因组DNA消化，适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后，10–14 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。
RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积（10 µl）RNA，重复性好，适用于敏感的定量基因表达分析，包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。