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高效液相色谱仪同时测定油脂中的9种抗氧化剂
高效液相色谱仪同时测定油脂中的9种抗氧化剂
本文采用
高效液相色谱仪
测定的9种酚类抗氧化剂是:没食子酸丙酯(PG)、2,4,5一三羟基苯丁酮(THBP)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)、去甲二氢愈创木酸(NDGA)、丁基化羟基茴香醚(BHA)、二叔丁基羟甲基苯酚(Ionox-100)、没食子酸辛酯(OG)、丁基化羟基甲苯(BHT)、没食子酸十二酯(DG)。
1.1 仪器和试剂
高效液相色谱仪
,带紫外检测器;
提取器:25 mL具塞玻璃离心管;
液体混匀器;
离心机;
旋转真空浓缩仪。
乙腈、甲醇:色谱纯;
正己烷、异丙醇:分析纯,重蒸;
乙酸:分析纯;
水:重蒸水;
乙腈饱和正己烷、正己烷饱和乙腈:将乙腈与正己烷混摇2 min,使其相互饱和,静置,分层,在下述提取
净化过程中均使用这种饱和溶剂;抗氧化剂标准品:PG、Ionox-100、BHT、TBHQ,NDGA、OG、DG,THBP,BHA;
标准贮备液(1.00 mg/mL):以异丙醇-乙腈(1+1,V/V)配制,冷冻避光保存;
标准工作液:使用前以异丙醇-乙腈(1+1,V/V)稀释至适当浓度。
1.2 色谱条件
流动相:A=1.5%(V/V)乙酸-甲醇溶液,B=1.5%(V/V)乙酸水溶液;
色谱柱: RP-C18 (5 μm,250 mm×4.6 mm i.d.),保护柱:RP-C18 (5 μm,40 mm×4.6 mm i.d.)。
柱温:40℃;
检测波长:280 nm;
进样量:20 μL。
梯度洗脱曲线见图1。
1.3 实验方法
称取1.00 g试样于提取器中,加入5 mL乙腈饱和正己烷,在液体混匀器上振荡片刻以充分溶解油样,加入10 mL正己烷饱和的乙腈,于液体混匀器上快速混匀1 min,以3 000 r/min离心3min ,将乙腈层转入50 mL浓缩瓶内,正己烷层再以乙腈提取两次,每次10mL,合并乙腈层于浓缩瓶内。合并的提取液在40℃水浴中,以旋转真空浓缩至约1 mL左右,将浓缩液转至5 mL刻度管中,并以少许异丙醇洗涤浓缩瓶,合并洗涤液于刻度管中,以异丙醇定容至2 mL,经0.45 μm滤膜过滤,立即进行
高效液相色谱仪
分析,外标法定量。
高效液相色谱仪同时测定油脂中的9种抗氧化剂
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