ELISA实验显色淡灵敏度低的原因和解决方案

日期：2024-11-23 19:30

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摘要：①试剂盒在运输途中时间太长，温度太高。 ②试剂盒未充分平衡。 ③培养箱温度不足37℃。 ④保温时间不足。 ⑤洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加。 ⑥移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁。 ⑦蒸馏水水质有问题。 ⑧底物作用时间不足。解决方案：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温，试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意校正定时钟准确定时按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密吸嘴内壁要清洁，尽量一次性使用使用新鲜合格的蒸馏水。

ELISA实验测定的操作步骤相对简单，但有可能会影响测定结果的因素却较多，分布在测定操作的各步之中，尤以加样、温育和洗板为甚。显色淡灵敏度低其原因可能为

①试剂盒在运输途中时间太长，温度太高。

②试剂盒未充分平衡。

③培养箱温度不足37℃。

④保温时间不足。

⑤洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加。

⑥移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁。

⑦蒸馏水水质有问题。

⑧底物作用时间不足。

解决方案：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温，试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意校正定时钟准确定时按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密吸嘴内壁要清洁，尽量一次性使用使用新鲜合格的蒸馏水。

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