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ELISA实验中显色淡,灵敏度偏低的原因

日期:2024-11-21 23:16
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摘要: 1. 试剂盒在运输途中时间太长,温度太高;所以尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温。 2. 试剂盒未充分平衡;所以试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。 3. 培养箱温度不足37℃,应注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意。 4. 保温时间不足;所以做实验时一定注意时间的重要性,如果怕忘了时间,可以校正定时钟准确定时。 5. 洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加;按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数。 6. 移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁;所以保证校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁。 7. 蒸馏水水质有问题,要使用新鲜合格的蒸馏水。
elisa法就是酶联免疫吸附测定法的简称。elisa法可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,是一种敏感性高、特异性强、重复性好的定量的实验诊断方法。其原理是采用抗原与抗体特异反应将待测物与酶连接,酶与底物产生颜色反应。在日常实验中如果遇到显色淡,灵敏度偏低是什么造成的呢?
 1. 试剂盒在运输途中时间太长,温度太高;所以尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温。
 2. 试剂盒未充分平衡;所以试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。
 3. 培养箱温度不足37℃,应注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意。
 4. 保温时间不足;所以做实验时一定注意时间的重要性,如果怕忘了时间,可以校正定时钟准确定时。
 5. 洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加;按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数。
 6. 移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁;所以保证校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁。
 7. 蒸馏水水质有问题,要使用新鲜合格的蒸馏水。
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