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ELISA实验酶标板整体背景高现象解读

日期:2025-06-20 03:57
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摘要: ELISA实验酶标板整体背景高,造成该现象的原因有4个: 1、抗体非特异性结合。——应确保进行了封闭并且使用的是恰当的封闭液,zui好使用5%~10%的与二抗同种动物来源的血清或牛血清,确保板孔经过预处理以防止非特异结合,使用亲和力强、纯度高的抗体,zui好经过了预吸收处理; 2、底物结合浓度过高或反应时间过长。——应调整底物的浓度,当酶标板显色足够进行吸光度读数时立即使用终止液终止反应; 3、底物溶液不新鲜或被污染。——应检测底物溶液,正常的底物溶液应该是清亮透明的,如果变黄或其他颜色则是被污...

ELISA实验酶标板整体背景高,造成该现象的原因有4个:

1、抗体非特异性结合。——应确保进行了封闭并且使用的是恰当的封闭液,zui好使用5%~10%的与二抗同种动物来源的血清或牛血清,确保板孔经过预处理以防止非特异结合,使用亲和力强、纯度高的抗体,zui好经过了预吸收处理;

2、底物结合浓度过高或反应时间过长。——应调整底物的浓度,当酶标板显色足够进行吸光度读数时立即使用终止液终止反应;

3、底物溶液不新鲜或被污染。——应检测底物溶液,正常的底物溶液应该是清亮透明的,如果变黄或其他颜色则是被污染的标志;

4、底物孵育过程没有避光。——底物孵育应该在避光环境下进行。

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