新闻详情
引物引起PCR反应假阴性问题的解决方案
日期：2025-06-20 03:53
浏览次数：28
摘要：
引物引起PCR反应假阴性问题的解决方案：
a. 引物质量。
b. 引物的浓度。
c. 两条引物的浓度是否对称。
解决对策：
a. 选定一个好的引物合成单位。
b. 引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。
c. 引物应高浓度小量分装保存，防止多...
引物引起PCR反应假阴性问题的解决方案：
a. 引物质量。
b. 引物的浓度。
c. 两条引物的浓度是否对称。
解决对策：
a. 选定一个好的引物合成单位。
b. 引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。
c. 引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。
d. 引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。