聚合酶链式反应(PCR)通常包括实验组和对照组,其区别如下:
实验组:
该组是进行PCR扩增的样本组。实验组是需要进行检测或者分析的样品,其PCR扩增反应中包含需要检测的基因、DNA或RNA等物质。实验组在PCR反应中需要添加特异性引物以扩增需要检测的物质,依据PCR扩增的结果进行后续的分析和判断。
对照组:
该组是为了验证实验组用途、确立PCR反应条件以及排除干扰因素而设立的对照组。一般,对照组可分为正对照组和负对照组:
- 正对照组:含有已知的目标序列或标准品。它的目的是验证PCR反应体系是否能正常工作、引物是否正确、PCR扩增条件是否设定正确等。正对照物可以是基因片段、质粒DNA、RNA、cDNA等标准物质。
- 负对照组:该组反应体系中不含特定的目标序列或基因片段,是一种阴性对照。它的主要作用是排除可能存在的污染、假阳性或假阴性等错误。负对照组在PCR反应中应用纯化的水(或缓冲液+酶)代替样品,进行与实验组完全一致的PCR反应,以确认任何阳性信号的来源。
通过对比实验组和对照组的PCR反应结果,可以进行正式数据分析和判断。在实验的过程中,对照组是进行PCR扩增和检测过程中非常重要的一个环节,有效地避免了实验误差和假阳性、假阴性等错误。