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产品名称
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蔗糖磷酸化酶检测试剂盒
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规格
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盒
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货号
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XG-0113374
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样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (通过过滤)。
4 ). 通过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
小鼠结肠癌细胞;CT26.WT [CT26WT]白花前胡乙素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Praeruptorin B
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 细胞裂解液 (阳性对照) 白术内酯Ⅱ;苍术内酯II(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Atractylenolide
II
CM-M013小鼠肺大静脉内皮细胞完全培养基100mL断血流皂苷A(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Clinodiside A
KYSE 150细胞,食管鳞癌 神经胶质瘤细胞,U251细胞 兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF三白草酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Sauchinone
CCD-1095Sk(浸润性导管癌旁皮肤细胞) 5×106cells/瓶×2甘草酸质量规格:UV>98%,BRGlycyrrhizic
acid
狗肾细胞隆突型;MDCK superdome十八醇1克
PANC-1细胞,胰腺癌细胞 横纹癌细胞,A673细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF六羰基 ChroMiuM
hqxcccrbonyl 13007-9-6
HO-8910(卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2dehyde
(94.0-100.5%) 500G 通用试剂
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(细胞分离液) 100ml本试剂1米
成纤维细胞裂解物HMFL(DL-苹果酸)
乙型流感病毒(IFVB-V1)分型单重荧光PCR检测试剂盒48Tigecycline269
轮状病毒A型单重荧光PCR检测试剂盒48Medetomidine 863475盐酸美托咪啶
轮状病毒B型单重荧光PCR检测试剂盒48Methyl 2,2-dithienylglycolate264475
轮状病毒C型单重荧光PCR检测试剂盒48Tiotropium bromide13633噻托溴铵
诺如病毒(NV)通用单重荧光PCR检测试剂盒484-(4-(5-(Aminomethyl)-oxooxazolidin-yl)phenyl)morpholin-one
8985436
蔗糖磷酸化酶检测试剂盒人凝血因子Ⅷ(F8)酶联吸附测定试剂盒 别称: Human
F8(Coagulation Factor Ⅷ) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组F8浓度
人纤维胶凝蛋白1(FCN1)酶联吸附测定试剂盒 别称:FCNM, M-ficolin
Human FCN1(Ficolin 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组FCN1浓度
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