操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
|
产品名称
|
293T人胚肾细胞
|
英文名称
|
293T
|
|
分类
|
人细胞系
|
货号
|
XG-X3215
|
|
组织来源
|
肾
|
形态
|
上皮细胞样
|
细胞别称；293T人胚肾细胞（STR鉴定正确）
种属来源；人
组织来源；肾
生长特性；贴壁生长
细胞形态；上皮细胞样
细胞代数；10代以内
背景简介；293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T
STR位点；Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:12,14；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D21S11:28,30.2；D3S1358:15,16,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；PentaD:9,10；PentaE:7,15；TH01:7,9.3；TPOX:11；VWA:16,19
生物等级；1
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
保藏机构；ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635；中国典型培养物保藏中心细胞库
倍时间；~24-30 hours
培养基；90% DMEM+10% FBS+PS
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
磷酸化CD156b抗体 phospho-ADAM17 (Thr735)
磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体 phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50)
Bcl2 alpha蛋白抗体 Bcl-2 alpha
CD13抗体 CD13
细胞中心粒蛋白抗体 POC5
线粒体核糖体蛋白L2抗体 MRPL2
β淀粉样肽（C端）抗体 Aβ1-42 (CT)
艾滋病病毒1诱导蛋白HIN1抗体 OTUD4/HIV 1 induced protein HIN 1
溶质载体家族蛋白22成员A7抗体 SLC22A7
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体 ABCD4
LIM结构域结合蛋白3抗体 LDB3
Menin抑癌蛋白抗体 Menin
肿瘤/睾丸抗原47B1抗体 CT47B1
周期素B3抗体 Cyclin B3
干燥综合征相关蛋白2抗体 RO60
海马丰富基因转录蛋白1抗体 HIAT1
Annexin V-FITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒50T
293T人胚肾细胞小鼠白介素1β前体(pro-IL1B)elisa检测试剂盒
大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)elisa检测试剂盒
石蜡切片组织线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠神经细胞粘附分子1(NCAM1)elisa检测试剂盒
大鼠肌红蛋白(MYO)elisa检测试剂盒
细胞PLK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人基质金属蛋白酶-10（MMP-10）elisa检测试剂盒
牛唾液酸(SA)elisa分析检测试剂盒
石蜡切片总游离菲律宾（FILIPIN）荧光直接染色试剂盒
小鼠黄体**素(LH)elisa检测试剂盒
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa分析检测试剂盒
鹅钙结合蛋白(CR)elisa分析检测试剂盒
CR ELISA Kit
人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
HumanherpessimplexvirusⅠ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)antibody(IgG)ELISAkit
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报