细胞特性
英文名称
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CFPAC-1:CFPAC1
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货号
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XG-X3271
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分类
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人细胞系
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种属
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人
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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组织来源
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胰腺管腺癌,肝转移
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用途
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仅供科研研究实验
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生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 IMDM+10%
FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 CFPAC-1细胞是胰腺管腺癌细胞系,建自26岁白人男性囊性纤维变性(CF)的肝转移灶。CFPAC-1细胞表达囊性纤维变性跨膜调节因子(CFTR),CFPAC-1细胞形态为上皮细胞样且顶端微绒毛极化。CFPAC-1细胞表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原,倍增时间为30-32小时。CFPAC-1细胞是亚3倍体的细胞系,36%的细胞的染色体模式数为75。CFPAC-1细胞传代至24代时,可在抑制小鼠中致瘤。
年龄(性别) 男;26岁
组织来源 胰腺管腺癌,肝转移
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 胰腺癌细胞
生物等级 1
倍增时间 ~30-45 hours
致瘤性 Yes, in nude mice (passage 34)
抗原表达情况 CA19-9 antigen, 12000
units/mL, epithelial keratins
基因表达情况 carcinoembryonic antigen
(CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma
associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL;
epithelial keratins
保藏机构 ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理
1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
磷酸化心脏磷蛋白(Ser16+Thr17)抗体
phospho-PLB
(Ser16+Thr17)
热休克蛋白J1抗体
HSJ1
髓系细胞触发受体2抗体 Anti-TREM2
孕酮诱导阻断因子1抗体 Anti-PIBF1/C13orf24
26S蛋白酶调节亚型抗体 Anti-PSMC1/Proteasome 19S S4
鳞状细胞相关蛋白抗体 Anti-SCRO/DCUN1D1
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Rabbit Anti-Guinea
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phospho-HDAC8
(Ser39)
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磷酸化KB抑制蛋白β抗体 Anti-Phospho-IKB beta
(Ser23)
环指蛋白56 Anti-RNF56/CBLB
碳酸氢钠协转运蛋白4-A4突变型抗体 Anti-SLC4A4 variant A
大鼠17-α甲睾酮(17-αMT)elisa分析检测试剂盒
CFPAC-1人胰腺癌细胞17-αMT ELISA Kit
人脯氨酸羟化酶(PHD)elisa分析检测试剂盒
HumanPHDELISAKit
人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)elisa分析检测试剂盒
伊红甲基蓝(EMB)革兰氏阴性选择琼脂平板
小鼠组织蛋白酶D(CTSD)elisa检测试剂盒
大鼠葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)elisa检测试剂盒
MFSD10蛋白抗体
MFSD10
唐氏综合症细胞粘附分子2抗体
DSCAML1
NPIP样蛋白1抗体
NPIP-like protein 1
9号染色体开放阅读框23抗体
C9orf23
操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存
方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
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