操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
|
产品名称
|
GBC-SD 人胆囊癌细胞
|
英文名称
|
GBC-SD:GBCSD
|
|
分类
|
人细胞系
|
货号
|
XG-X3298
|
|
组织来源
|
胆囊癌
|
形态
|
上皮细胞样
|
细胞别称：GBC-SD；人胆囊癌细胞
种属来源：人
年龄性别：男，61岁
组织来源：胆囊癌
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：GBC-SD细胞株是刘博、王占民等2000年从一位61岁的男性低分化胆囊癌患者中建立的；GBC-SD细胞的形状有多边形、纺锤形和正方形；GBC-SD细胞能分泌CEA和CA19-9。GBC-SD细胞倍增时间：大约为21.4小时，可移植到裸鼠，**的肿瘤与原发肿瘤相似。
生物等级：
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：
保藏机构：KCB; KCB 201187YJ
培养基：1640+10% FBS+PS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：1640+10% FBS+PS
STR鉴定位点Amelogenin：X,Y；CSF1PO：11,11；D12S391：19,20；D13S317：8,12；D16S539：11,13；D18S51：14,21；D19S433：14,15.2；D21S11：30,31；D2S1338：17,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,11；D6S1043：20,20；D7S820：11,12；D8S1179：10,12；FGA：23,23；Penta E：12,12；TH01：7,10；TPOX：11,11；vWA：16,17；
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
腺衍生血管内皮生长因子抗体 Prokineticin 1
凝溶胶蛋白抗体 Gelsolin
FOXJ2蛋白抗体 FOXJ2
GTP结合蛋白SAR1B抗体 SAR1B
胰岛素促进因子重组兔单克隆抗体 PDX1
乙酰化组蛋白H3抗体 Histone H3 (acetyl K9)
多巴胺受体D1重组兔单克隆抗体 DRD1
法尼基转移酶β-亚单位抗体 FNTB
突触核膜蛋白2抗体 Nesprin 2
微管蛋白β辅助因子D抗体 Beta tubulin cofactor D
RSPH3蛋白抗体 RSPH3
SH3BGRL2蛋白抗体 SH3BGRL2
8号染色体开放阅读框74抗体 C8orf74
AF594标记的单体樱桃红荧光蛋白标签抗体 mCherry, Alexa Fluor 594 conjugated
钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体 KCNQ1
卷曲螺旋结构域蛋白114抗体 CCDC114
冰冻切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
GBC-SD 人胆囊癌细胞大鼠整合素α2(ITGA2)elisa检测试剂盒
通用型副伤A（Salmonella
Paratyphi A）定性基因检测试剂盒
小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa检测试剂盒
人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
组织CaM KII激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
小鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)elisa检测试剂盒
大鼠核受体亚家族1D组成员2(NR1D2)elisa检测试剂盒
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500T
小鼠过敏/补体片断4a(C4a)elisa检测试剂盒
微量琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 50次
石蜡切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）摩罗利
（mallory）染色试剂盒
鱼白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析检测试剂盒
IL-8 ELISA Kit
人丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒
MDAELISAKit
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报