操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷 步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min) 步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记 步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h) 步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存 方法二:使用无血清非程序冻存液 无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。 但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
产品名称
HEK-293A人胚肾细胞
英文名称
HEK-293A:HEK293A
分类
人细胞系
货号
XG-X3327
组织来源
肾;以腺病毒5DNA进行转化
形态
上皮细胞样
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项 该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。
参考资料(来源文献)
背景描述 293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。
年龄(性别) 胎儿
组织来源 肾;以腺病毒5DNA进行转化
细胞类型 转化细胞系
生物等级 BSL-2
倍增时间 ~24-30 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受体表达情况 vitronectin
保藏机构 ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
干冰运输及复苏好存活细胞
1) 冻存细胞的复苏
公司正在出售的产品:
聚磷酸肌醇磷酸酶4A抗体
INPP4A
锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体
ANKS1A
植物酶(glutaminase)活性比色法定量检测试剂盒
人低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)elisa分析检测试剂盒
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中胚层配对源蛋白2抗体
PRRX2
周期素依赖性激酶10
CDK10
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蛋白酪氨酸磷酸酶受体PCPTP1抗体 Anti-PCPTP1
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Cy5标记的驴抗羊IgG H&L
HEK-293A人胚肾细胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / Cy5
锌指蛋白481抗体
ZBTB26
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Monkey B virus Infections ELISA Kit
人多巴胺-β羟化酶(DBH)elisa分析检测试剂盒
DBHELISAKit
潜在型TGF-β结合蛋白2抗体
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