操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
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产品名称
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HUTU-80人十二脂肠腺癌
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英文名称
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HUTU-80:HUTU80
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分类
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人细胞系
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货号
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XG-X3369
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组织来源
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十二指肠
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形态
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上皮细胞样
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生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 每个HuTu-80细胞上，蛙皮su受体的位点多达6000个。
年龄（性别） 53岁
组织来源 十二指肠
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肠癌细胞
生物等级 1
致瘤性 Yes, in nude mice; forms well
differentiated papillary adenocarcinoma (grade I).
受体表达情况 bombesin
抗原表达情况 Blood Type B; Rh+
保藏机构 ATCC; CRL-7928ATCC; HTB-40
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
磷酸化乳腺癌易感基因相互作用蛋白1抗体 phospho-BRIP1/BACH1 (Ser990)
磷酸化细胞信号转导分子SMAD5抗体 phospho-SMAD5 (Ser463 + Ser465)
DMRT1蛋白抗体 DMRT1
DUS2L蛋白抗体 DUS2L
锌指蛋白213抗体 ZNF213
锌指蛋白587抗体 ZNF587
表皮生长因子反应蛋白2抗体 BRF2
叉头蛋白L2抗体 FOXL2
肾素/血管紧张素形成酶Ren1抗体 Renin
嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1前体蛋白抗体 CCL1 precursor
O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶抗体 MGMT
PE-Cy5.5标记小鼠CD4单克隆抗体 Mouse CD4/PE-Cy5.5
转移生长因子β受体3抗体 TGF beta Receptor III
组蛋白赖氨酸N-甲基EZH1抗体 EZH1
核酸酶抗体
环指蛋白5抗体 RING5
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)elisa分析检测试剂盒
HUTU-80人十二脂肠腺癌小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)elisa检测试剂盒
进行凝集（aggregation）采用典型的夹心法酶联吸附测定。所提供的elisa检测试剂盒是典型的夹心法酶联吸附测定elisa检测试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
血液甘肽过氧化物酶（GSH PX）活性酶动力比色法定量检测试剂盒
小鼠组织蛋白去乙酰化酶2(Hdac2/Yy1bp)elisa检测试剂盒
大鼠前列腺素E1（PGE1）elisa检测试剂盒
蛋白胨铁琼脂平板
兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)elisa分析检测试剂盒
人S100钙结合蛋白P(S100P)elisa分析检测试剂盒
体液尿激酶（UROKINASE）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa分析检测试剂盒
大鼠固醇调节元件结合蛋白1A(SREBP-1A)elisa检测试剂盒
丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)elisa分析检测试剂盒
MAPK ELISA Kit
人白介素24(IL-24)elisa分析检测试剂盒
HumanIL-24ELISAKit
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