细胞特性
产品名称
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KATO III人胃癌细胞
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英文名称
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KATO III:KATO III
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分类
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人细胞系
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货号
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XG-X3390
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组织来源
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器官:胃;:胃癌;取材转移灶:胸水、锁骨及腋窝结和道格拉斯氏陷凹
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形态
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上皮细胞样
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细胞别称:Kato III; Kato-III; KATO-III;
KATOIII; KatoIII; KATO 3; JTC-28; Japanese Tissue Culture-28
种属来源:人
年龄性别:男,55岁
组织来源:器官:胃;:胃癌;取材转移灶:胸水、锁骨及腋窝结和道格拉斯氏陷凹
生长特性:半贴半悬
细胞形态:上皮细胞样
背景简介:KATO III人胃癌细胞来源于55岁的亚洲男性的转移性胃癌,来源部位:胸腔积液、锁骨及腋窝结和道格拉斯氏陷凹(Douglas
cul-de-sac)
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:
保藏机构:ATCC; HTB-103 ECACC; 86093004
培养基:IMDM+20% FBS+PS
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:~32-36小时
STR鉴定位点Amelogenin: X;CSF1PO: 7,11;D13S317: 8,12;D16S539: 10,12;D5S818: 10,11;D7S820: 8,12;THO1: 7,9;TPOX: 11;vWA:
14,16。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理
1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
脱碘酶2抗体 DIO2
维甲酸受体β抗体 RARB
SARM蛋白抗体 SARM1
SMCR8蛋白抗体 SMCR8
Ⅱ型胶原α1 N端前体肽抗体 procollagen type IIA
AF680标记的环指蛋白15抗体 RNF15, Alexa Flour
680 conjugated
减数分裂特异核结构蛋白1抗体 MNS1
金属蛋白酶抑制因子RECK抗体 RECK
异戊烯半胱氨酸羧基甲基转移酶抗体 ICMT
原癌基因wnt7a蛋白抗体 WNT7A
泛素化组蛋白H2AX抗体 H2AX (Ubiquityl Lys119)
肺癌相关蛋白8抗体 HLC8
G蛋白α抑制蛋白2抗体 G protein alpha
Inhibitor 2
G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体 GPR158
脑特异性磷脂酸磷酸酶样蛋白1抗体 LPPR4
盘状结构域受体蛋白2抗体 CD167b/DDR2
大鼠白介素33(IL33)elisa检测试剂盒
KATO III人胃癌细胞小鼠黄嘌呤脱氢酶(XDH)elisa检测试剂盒
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片总高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒
鱼白介素1β(IL-1β)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠神经元特异性烯醇化酶(NSE)elisa检测试剂盒
线虫甲磺酸乙脂(EMS)诱导突变试剂盒
豚鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)elisa分析检测试剂盒
人不对称二甲基精氨酸(ADMA)elisa检测试剂盒
组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
小鼠神经调节蛋白2(NRG2)elisa检测试剂盒
大鼠活性氧调制因子1(ROMO1)elisa分析检测试剂盒
仓鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa分析检测试剂盒
TNF-α ELISA kit
人对氧磷酶-3(PON3)elisa分析检测试剂盒
PON3ELISAKit
操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存
方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
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