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产品资料

NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞

NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞
  • 产品型号:XG-X3469
  • 产品展商:西格
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞公司正在出售的产品:NP-69 皮质醇(Cortisol)elisa生化含量试剂盒 Sea Lion Cortisol ELISA kit 人胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)elisa生化检测试剂盒 小鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)elisa生化酶联试剂盒
产品描述

操作步骤:


步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存

方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。

细胞特性

产品名称

NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞

英文名称

NCI-H295R:NCIH295R

分类

人细胞系

货号

XG-X3469

组织来源

器官:肾上腺

形态

上皮细胞样

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养方案A(默认)

生长培养基:

DMEM/F12+0.5% ITS-G100×)+10% FBS1% P/S

培养条件:

气相:空气,95%CO25%, 温度:37

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2-3/

参考资料(来源文献)

背景描述 NCI-H295R细胞是源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295细胞,后者由Gazdar·A·F等建立,从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞,群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长,而NCI-H295R细胞呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄的能力,对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。

年龄(性别) 女性;48

组织来源 器官:肾上腺

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肾上腺皮质癌细胞

生物等级 BSL-1

基因表达情况 aldosterone; cortisol; C19 steroids

保藏机构 ATCC; CRL-2128

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

 细胞处理

1) 冻存细胞的复苏

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

公司正在出售的产品:

小鼠尿微量白蛋白(ALB)elisa检测试剂盒

一氧化氮合酶转运诱导抗体

NOSTRIN

通用转录因子III/WBSCR11抗体

鸭子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)elisa生化检测试剂盒

pAMPK ELISA Kit

人半乳糖(Galactose)elisa生化检测试剂盒

HumanGalactoseELISAKit

活体细胞半胱-10CASPASE-10)活性原位荧光染色检测试剂盒

B细胞受体相关蛋白31(BCAP31)elisa检测试剂盒

大鼠C(C-Peptide)elisa检测试剂盒

GTF2IRD1

酪蛋白硫酸转移酶1抗体  Anti-TPST1

细胞色素P450 1A2抗体  Anti-P450 1A2/CYP1A2

磷酸化蛋白激酶C nu型抗体  Anti-phospho-PRKD3(Ser41)

亚砷盐相关蛋白抗体  Anti-Spindly/CCDC99

PE-CY5标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体

NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb / PE-Cy5

FAM9B蛋白抗体

FAM9B

c-jun elisa生化检测试剂盒

Humanc-junELISAKit

小鼠凝血酶受体(TR)elisa生化检测试剂盒

TRELISAKit

大鼠β2整合素(ITG β2/CD11+CD18)elisa生化检测试剂盒

ITG β2/CD11+CD18 Elisa Kit

人核糖体蛋白S25(RPS25)elisa生化检测试剂盒

RPS25ELISAkit

猪热休克蛋白40(HSP-40)elisa检测试剂盒

大鼠睫状神经营养因子(CNTF)elisa检测试剂盒

动物细胞钠/ATP酶(Na/K+ -ATPase)活性比色法

人水通道蛋白-4AQP4elisa检测试剂盒

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