操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷 步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min) 步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记 步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h) 步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存 方法二:使用无血清非程序冻存液 无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。 但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
产品名称
NCI-H446人小细胞肺癌细胞
英文名称
NCI-H446:NCIH446
分类
人细胞系
货号
XG-X3472
组织来源
肺;转移灶:肋膜渗出癌;小细胞肺癌
形态
上皮细胞样
生长特性 半贴半悬
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 NCI-H446细胞是从一位小细胞肺癌患者的胸水中建立的,NCI-H446细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。NCI-H446细胞是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元特有的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶。NCI-H446细胞内多巴脱羧酶、蚕素、抗、催产素或胃泌释放肽未达到可检测水平。C-myc DNA序列扩增约20倍,c-myc RNA比正常细胞增加15倍。初,传代培养基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氢化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml铁传递蛋白、10nM 17-β-雌二醇、30nM亚硒酸钠)。
年龄(性别) 男性;61岁
组织来源 肺;转移灶:肋膜渗出癌;小细胞肺癌
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物等级 BSL-1
致瘤性 Yes, in nude mice (The cells form transplantable tumors with non-typical SCLC histology).
保藏机构 ATCC; HTB-171
干冰运输及复苏好存活细胞
1) 冻存细胞的复苏
公司正在出售的产品:
小鼠前列腺素D2(PGD2)elisa检测试剂盒
重组蛋白G抗体
Protein G
细胞纤毛内转运同源蛋白43抗体
A型流感病毒核输出蛋白抗体
Influenza A Nuclear export protein
22号染色体开放阅读框40抗体
C22orf40
冰冻切片半胱-6(CASPASE-6)活性原位荧光染色检测试剂盒
人c-sis elisa生化检测试剂盒
大鼠P53elisa检测试剂盒
IFT43
神经突起生长诱导因子受体Unc5a抗体 Anti-Unc5a/UNC5H1
足细胞表达蛋白/转录因子21抗体 Anti-POD1/TCF-21
丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1调节亚基10抗体 Anti-PNUTS/PPP1R10
泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶5抗体 Anti-SENP5
辣根过氧化物酶标记的驴抗兔IgG H&L
NCI-H446人小细胞肺癌细胞Donkey Anti-Rabbit IgG H&L / HRP
FRMD3蛋白抗体
FRMD3
犬CC趋化因子受体2(CCR2)elisa生化检测试剂盒
CCR2 ELISA kit
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)elisa生化检测试剂盒
PPAR-γELISAKit
猴补体蛋白5(C5)elisa生化检测试剂盒
C5 ELISA kit
人儿茶酚抑素elisa生化检测试剂盒
HumancatestatinELISAKit
鱼白介素10(IL-10)elisa生化检测试剂盒
大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)elisa检测试剂盒
组织沉默调节蛋白1 (SIRT1)活性比色法定量检测试剂盒
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)elisa检测试剂盒